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摘要目的：<br>　　1. 设计、合成具有一定抗肿瘤活性的金属钌(Ⅱ) 配合物。<br>　　2. 探讨金属钌(Ⅱ) 配合物通过光动力疗法诱导 HeLa 细胞发生焦亡并增强免疫原性死亡 ( ICD ) 的抗肿瘤机制。<br>　　3. 探讨金属钌(Ⅱ) 配合物体外诱导 A549 细胞发生凋亡和抗肿瘤免疫活性机制。<br>　　方法：<br>　　1. 通过质谱、高效液相色谱和元素分析等方法对金属钌(Ⅱ) 配合物的结构进行表征，并借助紫外-可见吸收光谱和荧光光谱分析其光物理特性。<br>　　2. 金属钌(Ⅱ) 配合物的体外抗肿瘤活性通过 MTT 法进行检测。借助激光共聚焦显微镜技术，深入探究该配合物在肿瘤细胞内亚细胞器的定位、摄取机制以及钙离子分布特征等情况。利用流式细胞仪分析其对细胞周期进程、细胞内活性氧 ( ROS ) 水平以及线粒体损伤的潜在影响。应用免疫荧光染色法检测通过药物刺激肿瘤细胞释放的损伤相关分子模式 ( DAMPs ) 中钙网蛋白 ( CRT ) 和高迁移率族蛋白1 ( HMGB1 ) 的变化情况。采用 DAPI 染色进一步验证配合物对细胞凋亡的影响。最后，运用 Western Blot 技术验证药物对肿瘤细胞焦亡相关蛋白和凋亡相关蛋白表达的影响。<br>　　3. 体内小鼠实验验证金属钌(Ⅱ) 配合物所制备疫苗的生物安全性和抗肿瘤免疫的有效性，选择Hamp;E染色观察小鼠主要器官的病理变化情况，通过流式细胞技术检测分析小鼠脾脏及肿瘤组织中相关免疫细胞的水平变化。<br>　　结果：<br>　　1. 第一章：设计、合成及表征三个金属钌(Ⅱ) 配合物 Ru1-Ru3。配合物对HeLa、A549、MCF-7、143B和HepG2这些肿瘤细胞的暗毒性比较低，而光毒性则比暗毒性增加了 11-153 倍。在这三个金属钌(Ⅱ) 配合物中，Ru3 展现出最高的光动力活性，并且对 HeLa 细胞的光毒性指数达到最大值 ( 153 ) 。细胞内定位和摄取机制的实验结果显示，Ru3通过能量依赖的方式进入HeLa细胞。进一步研究发现， Ru3应用光动力疗法可通过线粒体、内质网和细胞核的级联递送机制，能够诱导一系列线粒体损伤和内质网应激相关事件的产生，刺激肿瘤细胞释放的DAMPs 中CRT和HMGB1的产生。随后进入细胞核内断裂DNA从而有效诱导HeLa细胞发生焦亡并且通过cGAS-STING通路增强其免疫原性死亡，从而提高机体的抗肿瘤免疫效应。<br>　　2. 第二章：设计合成及表征四个金属钌(Ⅱ) 配合物 Ru4-Ru7。在A549、HeLa、MCF-7、MDA-MB-231、143B 和 HepG2 等肿瘤细胞中，这四种金属钌(Ⅱ) 配合物均显示出良好的抗肿瘤增殖毒性。其中配合物 Ru4-Ru5 是本章所筛选的药物中抗癌活性最好的两个，对A549 的细胞毒性最强。细胞内定位和摄取机制的实验结果表明，配合物 Ru4-Ru5 以能量依赖型方式进入细胞，且能有一定选择性地定位于A549细胞的内质网。进一步抗肿瘤机制研究发现，Ru4-Ru5都能够使得细胞内 ROS 水平升高和内质网应激导致钙离子紊乱。免疫荧光染色法检测结果显示通过药物刺激的肿瘤细胞会释放DAMPs中CRT和HMGB1等，最终采用DAPI染色验证配合物能够导致A549细胞发生凋亡。<br>　　结论：<br>　　1. 第一章合成的金属钌(Ⅱ) 配合物具有强光毒性，Ru3 应用光动力疗法可通过线粒体、内质网和细胞核的级联递送机制，诱导 HeLa细胞发生焦亡并且通过 cGAS-STING 通路增强其免疫原性死亡，从而提高机体的抗肿瘤免疫效应。<br>　　2. 第二章合成的金属钌(Ⅱ) 配合物具有良好的抗肿瘤活性， Ru4-Ru5能够特异性靶向内质网，并且能够引起内质网应激诱导钙离子紊乱激活免疫原性死亡,最终导致A549细胞凋亡。