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摘要硒（Selenium, Se）是一种人体必需的营养素，具有良好的生物学功能。而硒的“营养——毒性”剂量范围窄，精准补硒成为全球面临的重要挑战之一。纳米硒（Selenium nanoparticles, SeNPs）是一种新型的补硒剂，具有较高的抗氧化能力以及较低的毒性，但口服 SeNPs 在肠道内会受到肠黏液层的阻滞，影响其渗透、吸收效率。黏蛋白是黏液的关键结构性成分，SeNPs的黏液渗透性受到其与黏蛋白之间的相互作用影响，但其影响机制复杂，且目前缺乏相关研究，极大地限制了纳米硒安全的应用。本文采用四种不同分子量及带有不同功能基团的多糖（Polysaccharide，PS），成功制备了四种多糖纳米硒（PS-SeNPs），即壳寡糖纳米硒（COS-SeNPs）、壳聚糖纳米硒（CS-SeNPs）、壳聚糖季铵盐纳米硒（HACC-SeNPs）和羧甲基纤维素纳米硒（CMC-SeNPs），并对四种 PS-SeNPs 与黏蛋白的相互作用和黏液渗透行为及机制进行了研究和验证。主要研究内容及结论如下：<br>　　（1）分别制备四种PS-SeNPs，并对其粒径、电位、亲疏水性等物化结构进行表征。采用红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等分析PS与SeNPs的结合方式，借助透射电镜、纳米粒度仪、接触角测量等表征PS-SeNPs的形貌、粒径、电位、亲疏水性等基本理化性质。结果表明，所有PS-SeNPs均呈分布均匀的球形，实际粒径均小于100 nm。PS与SeNPs之间通过Se···O-H及 Se···N-H氢键作用从而形成具有共轭结构的PS-SeNPs。PS-SeNPs的表面电荷及亲疏水性很大程度上由PS的表面电荷及亲疏水性决定，其中COS-SeNPs、CS-SeNPs及HACC-SeNPs带正电，电位值分别为32.2 ± 0.1 mV、62.5 ± 1.5 mV及56.3 ± 0.3 mV， CMC-SeNPs 带负电，电位值为-32.0 ± 1.1 mV。PS-SeNPs 的疏水性从大到小依次为HACC-SeNPs、CS-SeNPs、CMC-SeNPs、COS-SeNPs。综上，由于四种多糖的功能基团及分子量不同，所制备出的四种PS-SeNPs表面电荷及亲疏水性有所差异。<br>　　（2）从结构、热力学、动力学角度，探究 PS-SeNPs与黏蛋白之间相互作用的机制。利用透射电镜、浊度、纳米粒度仪、红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱、荧光光谱、流变仪、等温滴定量热、分子动力学模拟等手段综合分析 PS-SeNPs 与黏蛋白之间的宏观及微观相互作用。结果表明，PS-SeNPs 与黏蛋白的相互作用受黏液pH及PS-SeNPs的表面电荷性质与电荷量的影响。PS-SeNPs与黏蛋白的非共价化学作用在pH 5.2条件下比在pH 7.4条件下更强，且黏蛋白网络交联程度更大，尺寸排阻效应及相互作用效应同时增强。在pH 7.4条件下，所有PS-SeNPs与黏蛋白的作用均由疏水相互作用主导；而在pH 5.2条件下，带正电的PS-SeNPs 与黏蛋白的作用由静电相互作用主导，带负电的 PS-SeNPs 与黏蛋白的作用由疏水相互作用主导。同为带正电颗粒，HACC-SeNPs 比 COS-SeNPs、CS-SeNPs的质子化程度更高，与黏蛋白的作用更强。综上，PS-SeNPs的表面电荷可调控PS-SeNPs与黏蛋白的相互作用主导力，且该调控作用在不同的pH环境下有差异。<br>　　（3）采用体外黏液模型-细胞模型-动物模型，多维度研究并验证PS-SeNPs的黏液渗透行为。利用体外黏液模型表征PS-SeNPs的表观渗透系数，在Caco-2/HT29-MTX-E12细胞共培养模型下验证其渗透，进一步借助动物离体组织荧光成像及切片成像观察颗粒滞留情况，对颗粒渗透情况进行体内外验证。结果表明，在体外黏液及细胞模型中，CS-SeNPs、HACC-SeNPs 及 CMC-SeNPs 在 pH 7.4条件下的渗透强于pH 5.2条件下的渗透，而COS-SeNPs在pH 7.4条件下的渗透弱于pH 5.2条件下的渗透。多粒子示踪、三维层扫及体内外渗透实验均表明，与其他PS-SeNPs 相比，HACC-SeNPs在pH 7.4及pH 5.2条件下与黏液吸附性最强，黏液渗透性最佳，HACC-SeNPs的黏液吸附可能促进其黏液渗透。根据扩散模型的预测，PS-SeNPs在10μm 厚度的黏液层中渗透24 h的渗透率将达87%以上，在100 μm 厚度的黏液层中渗透72 h的渗透率将在36% ~ 67%左右。综上，黏液环境pH的降低抑制颗粒渗透，颗粒表面的正电荷量对颗粒在黏液中的渗透有促进作用。