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摘要研究背景：急性胰腺炎(Acute pancreatitis，AP)是一种常见的急重症，其发病率和死亡率较高。急性胰腺炎包括了复杂的“瀑布样级联反应”，开始于胰腺腺泡细胞内的消化酶激活，造成腺泡细胞的损伤，导致局部和全身系统的炎症反应。环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)、核因子-κB(Nuclear factor-kappaB，NF-κB)在急性胰腺炎的炎症反应中有着重要作用。有研究认为，激活NF-κB是诱导COX-2表达所必需的。近来研究认为COX-2的诱导表达可能也是激活NF-κB所必需的。选择性COX-2抑制剂如塞来昔布(celecoxib)等目前在临床上应用较多，其对急性胰腺炎的治疗作用在动物实验中也得到了证实,但是其具体的作用机制尚不明确。本研究使用离体大鼠胰腺腺泡细胞，排除体内复杂的神经体液因素干扰，来进一步探讨塞来昔布对胰腺腺泡细胞中COX-2、NF-κB的作用，以及COX-2与NF-κB之间相互作用的关系。 目的和意义：分别观察离体大鼠胰腺腺泡细胞经CCK类似物雨蛙肽(cerulein)刺激和使用选择性COX-2抑制剂塞来昔布进行干预后细胞中COX-2和NF-κB的表达情况，进而探讨胰腺腺泡细胞中COX-2与NF-κB的关系及塞来昔布对胰腺腺泡细胞炎症的影响，为急性胰腺炎的发病机制提供部分实验依据。 研究方法：使用胶原酶法分离出雄性SD大鼠原代胰腺腺泡细胞，分为对照组、雨蛙肽组和塞来昔布干预组。雨蛙肽组加用终浓度为10－7 M的雨蛙肽；干预组预先加用塞来昔布，终浓度100 μM，15 min后加入雨蛙肽共孵育。各组细胞分别孵育1、3、6、12小时后进行各项指标检测：台盼兰试验检测细胞活力；酶动力化学法检测淀粉酶(AMS)分泌率和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率；RT-PCR法检测细胞中COX-2和NF-κB p65 mRNA表达；免疫组化法观察细胞中COX-2和NF-κB p65蛋白表达。 研究结果： 1）与对照组相比，雨蛙肽组各时间点大鼠胰腺腺泡细胞活力明显下降(P<0.05)，胰腺腺泡细胞淀粉酶分泌率和乳酸脱氢酶漏出率显著增高(P<0.05)；胰腺腺泡细胞中COX-2和NF-κB p65 mRNA表达显著增加(P<0.05)，COX-2和NF-κB p65蛋白表达增加。 2）与雨蛙肽组相比，塞来昔布干预组各时间点大鼠胰腺腺泡细胞活力明显改善(P<0.05)，胰腺腺泡细胞淀粉酶分泌率和乳酸脱氢酶漏出率明显下降(P<0.05)；胰腺腺泡细胞中COX-2和NF-κB p65 mRNA表达无显著差异。 3）雨蛙肽组中，大鼠胰腺腺泡细胞COX-2和NF-κB p65 mRNA的表达呈正相关。 主要结论及意义： 1）在大鼠胰腺腺泡细胞炎症的早期，COX-2、NF-κB即被启动，在细胞炎症早期阶段起着重要的作用；2）在胰腺腺泡细胞炎症中，COX-2与NF-κB的表达呈正相关；3）塞来昔布保护细胞膜、减轻细胞炎症而起到一定的治疗作用；4）塞来昔布对NF-κB的表达可能无抑制作用。