摘要目的:研究KCNQ1和NKCC1这两种通道蛋白在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关性表达,并分析这两种通道蛋白与年龄相关性听力下降(Age-related Hearing Loss,AHL)的关系及其在听力中的作用。<br> 方法:通过听性脑干反应(Auditory Brainstem Response,ABR)检测C57BL/6J小鼠各年龄段(4、8、14、24、40周龄)的听力变化。应用免疫组织化学检测方法确定KCNQ1和NKCC1蛋白在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁中的表达定位,并研究各年龄段C57BL/6J小鼠耳蜗外侧壁中两种通道蛋白含量随着鼠龄增加的表达变化。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测KCNQ1和NKCC1 mRNA在不同鼠龄小鼠耳蜗中的表达水平。<br> 结果:随着C57BL/6J小鼠年龄的增加,其ABR反应阈值逐渐升高,4周龄和8周龄C57BL/6J小鼠对Click和4kHz、8kHz刺激声的ABR反应阈值均无显著性差异(P>0.05),从14周龄后,C57BL/6J小鼠对三种刺激声的ABR反应阈逐渐增加,其数值与低龄组小鼠相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。KCNQ1蛋白主要表达于耳蜗血管纹的边缘细胞顶膜,而NKCC1蛋白主要表达于血管纹边缘细胞、螺旋韧带及螺旋缘处的纤维细胞。随着C57BL/6J小鼠鼠龄的增加,血管纹上KCNQ1和NKCC1蛋白的表达逐渐减少。KCNQ1和NKCC1 mRNA的表达量也随着鼠龄的增加呈现减少的趋势,其中40周龄C57BL/6J小鼠KCNQ1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异具有统计学意义(P<0.05),40周龄以及24周龄的NKCC1 mRNA表达水平同4周龄比差异具有统计学意义(P<0.05)。<br> 结论:C57BL/6J小鼠耳蜗血管纹的KCNQ1和NKCC1蛋白表达随着鼠龄的逐渐增大而逐渐地减少。KCNQ1和NKCC1 mRNA水平在C57BL/6J小鼠耳蜗的年龄相关性改变呈现下降趋势,其中40周龄的C57BL/6J小鼠KCNQ1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异有统计学意义(P<0.05),40周龄以及24周龄的NKCC1 mRNA表达水平同4周龄相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。KCNQ1和NKCC1两种通道蛋白在维持正常的听力中起着重要的作用。
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