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摘要[目的]肾细胞癌约占泌尿系恶性肿瘤的第3 位，其发病率及死亡率与肾癌的高度器官特异性转移密切相关，转移性肾癌更已证实为预后不良，近来研究报道通过RNA 干扰技术可以有效降低基因表达，这将对肾癌提供了一个新的治疗方法。已有越来越多的研究表明，趋化因子受体CXCR4(Chemokine receptor CXCR4)参与肿瘤侵袭和转移的多个关键环节。本研究主要通过运用RNA 干扰技术降低肾癌A498细胞株的CXCR4基因表达水平，观察转染后A498细胞株的生长及体外侵袭力的改变以及检测细胞周期和凋亡水平的变化。<br>　　 [方法]本实验针对CXCR4基因设计合成靶向特异性shRNA，将其连接到GPU6/GFP/Neo 质粒载体上，利用Lipofectamine2000脂质体转染剂转染至肾癌A498细胞株，通过RT-PCR和western blot 检测CXCR4mRNA及蛋白水平表达变化，MTT法及Transwell趋化侵袭实验观察转染后细胞株增殖及趋化侵袭能力的变化，流式细胞仪检查A498细胞周期和细胞凋亡水平变化。所有计量数据均以均数±标准差(x±s)表示，应用单因素ANOVA 进行样本均数间显著性检验，P<0.05表示统计学差异显著。<br>　　 [结果]1. 针对CXCR4基因序列特异性siRNA525转染A498细胞株后，shRNA 进入胞浆内，引起核酶变化，CXCR4基因的mRNA及蛋白表达量受到明显抑制，而空白组和对照组比较CXCR4基因水平无明显改变，证实特异性RNA 干扰质粒构建成功。2.在MTT及Transwell 趋化侵袭实验中，转染shRNA的A498细胞株增值能力和趋化侵袭能力明显降低，流式细胞仪检测观察A498细胞周期出现S和G2 期阻滞，细胞凋亡率明显升高。<br>　　 [结论]1. SDF-1/CXCR4 受体配体系统影响肾癌细胞的侵袭转移，该效应与CXCR4表达程度密切相关；阻断SDF-1／CXCR4 受体配体系统可抑制A498 肾癌细胞株的侵袭转移。提示CXCR4 可望成为肾癌治疗的靶基因。2.本实验将为进一步研究阻断CXCR4 核定位序列进而抑制肾癌转移提供理论基础。