摘要目的:构建大鼠失血性休克复苏肝脏缺血再灌注损伤模型,用免疫组化方法探讨TNF-α、NF-κβ在肝脏缺血再灌注损伤中的作用。<br> 方法:30只清洁级SD大鼠被随机分为假手术组(A组)、休克组(B组)、失血性休克/复苏(C组)亦称模型组。A组大鼠麻醉后,测平均动脉压(MAP)正常后直接处死采集大鼠肝组织。B组经股动脉穿刺置管放血,维持MAP为(35±5mmHg)持续 90min后处死采集大鼠肝组织。C组大鼠麻醉后,经股动脉穿刺置管放血,维持MAP为(35±5mmHg)维持90min,回输自体血液进行复苏,维持MAP 80-100mmHg,制作失血性休克复苏模型,复苏6h后处死采集大鼠肝组织。通过HE染色了解肝组织病理形态学改变, SP免疫组化测定各组大鼠肝脏TNF-α、NF-κβ表达情况,并采用全自动图像分析系统(Image-proplus 6.0)计算各组阳性区域积分吸光度。应用SPSS统计软件进行数据处理,计量资料用均数±标准差(±S)表示,成组资料采用单因素方差分析,进行方差齐性检验,各组间相互比较采用t检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。<br> 结果:A组HE染色肝组织结构及形态正常,B组见部分肝细胞空泡样变性,损伤较轻,C组肝组织损伤较最重,肝小叶结构不清,肝细胞出现明显的空泡变性,肝窦淤血,并见大量中性粒细胞渗出及肝脏巨噬细胞聚集。免疫组化结果显示:C组表达TNF-α、NF-κβ最高,二者平均积分吸光度值分别为(0.197±0.026,0.131±0.035);B组的表达较C组低,二者平均积分吸光度值分别为(0.133±0.023,0.098±0.028);A组阳性表达最低,二者平均积分吸光度值分别为(0.075±0.030,0.045±0.021)。并经SPSS软件分析,各组间相互比较采用t检验,P值均<0.05,差别具有统计学意义。<br> 结论:成功建立大鼠失血性休克复苏肝脏缺血再灌注损伤模型;失血性休克复苏后可能通过TNF-α及NF-κβ高表达引起肝脏缺血再灌注损伤。
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