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摘要血吸虫病是一种世界性的寄生虫传染性疾病，被列为世界十大恶性传染病之一，对人类及家畜的安全都具有极大的危害，是许多国家和地区政府都非常重视的公共安全问题。常规的预防和治疗手段难以遏制形势日益严峻的血吸虫疫情，疫苗作为一种良好的防治兼顾的措施，其研发具有重大的经济和社会价值。<br>　　 DNA疫苗是近20年才出现的疫苗概念，被誉为“第三代疫苗”，与常规的第一、二代疫苗相比具有显著的优势。至今已有近百种针对各种重大疾病的DNA疫苗处于实验室或临床研发阶段，其中已有四种兽用DNA疫苗被批准上市，但尚无DNA疫苗产品被批准用于人，概其原因主要是DNA疫苗的安全性评价体系尚缺乏规范的标准。本研究以日本血吸虫DNA疫苗为对象，旨在研究DNA疫苗在动物体内的分布和代谢规律。通过将绿色荧光蛋白EGFP基因和日本血吸虫抗原Sj23基因共同插入真核表达质粒pVIVO2中，构建了共表达和融合表达的DNA疫苗，应用PCR检测技术、荧光激发显色技术和酶联免疫吸附（ELISA）技术，分别在DNA水平，抗原水平和抗体水平上研究了DNA疫苗在动物体内的分布，表达及代谢规律，为血吸虫DNA疫苗的临床研究提供实验依据和数据支持。<br>　　 本研究初步取得了以下成果：<br>　　 (1)应用重组PCR技术成功构建了日本血吸虫23 Kda膜内在蛋白抗原Sj23基因和绿色荧光蛋白EGFP基因共表达的DNA疫苗pVIVO2-Sj23/EGFP和融合表达DNA疫苗pVIVO2-Sj23.EGFP，并进行了酶切和测序验证。<br>　　 (2)应用阳离子脂质体介导DNA疫苗转染人胚肾癌细胞系(HEK-293)进行体外表达验证，结果表明构建的DNA疫苗可以在真核细胞中正确表达。<br>　　 (3)采用高盐变性蛋白初步纯化和色谱柱串联精细纯化等方法纯化DNA疫苗，制备了医药级别的DNA疫苗产品。<br>　　 (4)肌肉注射DNA疫苗免疫BALB/c小鼠，利用PCR技术检测DNA疫苗在小鼠体内的生物分布，荧光显微镜检测抗原蛋白的表达分布，ELISA检测DNA疫苗诱发抗体的强度和存留时间。结果表明，DNA疫苗质粒在免疫后迅速分布于全身组织<br>　　 与器官，在注射部位等组织可存留80天以上，抗原蛋白表达持续时间超过7天，DNA疫苗中抗原蛋白诱导的特异抗体可存留70天以上，说明DNA疫苗诱发产生的保护力足以达到保护宿主抵御血吸虫侵染的目的。