检索历史 清除

摘要骨质疏松症(osteoporosis，OP)是以骨量减少、骨的微结构退化为特征的，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。骨质疏松症是年龄相关性疾病，人口老龄化程度越高，患病人数越多，骨质疏松症将严重危害中老年人群健康和生活质量。我国是人口大国，也是老年人口绝对数量最多的国家之一，人口老龄化呈逐步加快之势，骨质疏松发病率逐年增高。虽然目前抗骨质疏松药物种类有很多，但都存在一些问题，如副作用较大，疗效不显著、费用高等。近年来，根据流行病学调查及有关报道发现，长期服用小剂量阿司匹林一年以上，能够明显提高老年人骨密度，预示阿司匹林具有潜在的抗骨质疏松的效果。阿司匹林不但副作用少、廉价，而且治疗疾病的范围广泛，是中老年人的常用药。因此研究阿司匹林对骨质疏松的预防与治疗的确切疗效具有重要意义，可能为阿司匹林运用于临床抗骨质疏松的治疗提供理论依据。<br>　　目的：<br>　　探讨阿司匹林对骨髓基质干细胞（BMSCs）成骨性分化的影响，为进一步将阿司匹林应用于临床骨质疏松治疗奠定基础。<br>　　方法：<br>　　无菌条件下分离4周龄SD大鼠股骨和胫骨，提取骨髓并制成单细胞悬液，采用全骨髓贴壁法和细胞密度梯度分离法相结合的方式培养骨髓基质干细胞，获得特性稳定的3-6代BMSCs应用于本实验研究。通过成骨诱导培养基诱导BMSCs成骨性分化，并在诱导培养基中加入不同浓度阿司匹林（0.5、1、2、5、10mmol/L），分为低、中、高浓度组，同时设立对照组。观察培养细胞形态学变化，采用CCK-8法分析细胞增殖情况，绘制细胞生长曲线。使用ELISA等检测方法比较阿司匹林组与对照组细胞碱性磷酸酶（ALP）活性以及骨钙素（OC）分泌量的差异。应用钙结节染色、碱性磷酸酶染色观察比较成骨效果，并通过半定量分析比较各组之间的差异。<br>　　结果：<br>　　通过全骨髓贴壁法和细胞密度梯度分离法相结合的方式，得到纯度较高、特性稳定的骨髓基质干细胞，可以应用于实验研究。原代细胞多呈现为类圆形、短梭形、多角形或不规则形，可见细胞集落，大小不一。传代细胞体积较大，增殖速度快，细胞呈漩涡状生长，多为梭形、三角形或多角形，细胞核椭圆形或圆形。从细胞生长曲线上分析，阿司匹林无明显促进细胞增殖活性的作用，而且高浓度阿司匹林（＞5mmol/L）能够强烈抑制细胞增殖。中低浓度组浓度阿司匹林（0.5、1、2mmol/L）可促进BMSCs的成骨性分化，碱性磷酸酶含量、骨钙素分泌量在不同阶段显著高于对照组；14天茜素红染色可见中低浓度组钙结节数量高于对照组；碱性磷酸酶染色显示中低浓度组阳性细胞数量明显高于对照组。<br>　　结论：<br>　　中低浓度阿司匹林作用于骨髓基质干细胞可促进其骨向分化和成骨细胞特性表达,表明阿司匹林有促进骨代谢合成的作用，提示了阿司匹林通过促进骨髓基质干细胞骨向分化而具有潜在的治疗骨质疏松的作用，有可能成为治疗骨质疏松的新型药物。