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筛选靶向肝癌Bel-7402/ADM细胞MDR1基因的高效siRNA的实验研究

摘要目的:<br>  筛选出靶向人肝癌多药耐药细胞亚系Bel-7402/ADM细胞MDR1基因的高效siRNA,为逆转肝癌多药耐药提供新的分子靶点。<br>  方法:<br>  设计并化学合成4条靶向MDR1的siRNAs(mdr1si-1、mdr1si-2、mdrlsi-3和mdrlsi-4),通过Lipofectamine2000介导转染Bel-7402/ADM细胞株,用RT-PCR检测Bel-7402/ADM细胞MDR1 mRNA表达、western blot检测P-gp的表达和MTT检测细胞对ADM的敏感性,综合评价这4条siRNAs的沉默效果。<br>  结果:<br>  经siRNA干扰后,4条siRNAs均能不同程度逆转Bel-7402/ADM细胞MDR1介导的多药耐药。4条siRNA转染48小时后,mdrlsi-1组或mdrlsi-3组的mRNA的表达水平下降幅度较mdrlsi-4组或mdrlsi-2组差异有统计学意义(P<0.05);转染72h后P-gp蛋白的表达量由低到高依次为mdrlsi-1组,mdrlsi-3和mdrlsi-4组, mdrlsi-2组(P<0.05);mdrlsi-1组对ADM耐药的相对逆转率最高,mdrlsi-3组次之(P<0.05),mdrlsi-4组和mdrlsi-2组的差异无统计学意义(P>0.05)。<br>  结论:<br>  相比较其他3条siRNAs,mdr1si-1对人肝癌Bel-7402/ADM细胞MDR1介导的耐药逆转效果最好,其靶序列有望成为逆转肝癌多药耐药新的靶点。

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