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HSF1/HSPs在C57BL/6J小鼠耳蜗的表达

摘要目的:研究在年龄相关性听力损失(Age-relatedHearingLoss,AHL)模型中,热休克转录因子1(HeatShocktranscriptionFactor1,HSF1)mRNA及HSF1蛋白、热休克蛋白(HeatShockProtein,HSP)70及90在内耳的表达变化,并探讨在AHL模型中三者的关系以及在AHL发生发展中可能的作用机制。<br>  方法:分别随机选取4周、12周、24周、44周龄C57BL/6J小鼠为实验对象,应用实时定量聚合酶链反应(Realtime-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测HSF1在mRNA水平上在各年龄组小鼠内耳的表达水平;采用免疫组织化学、免疫荧光组织化学及westernblot方法确定HSF1、HSP70、HSP90蛋白在耳蜗内的定位及含量变化。<br>  结果:RT-PCR结果显示HSF1在mRNA水平上,表达随年龄增长而增加。免疫组织化学、免疫荧光组织化学显示HSF1主要表达于C57BL/6J小鼠耳蜗齿间细胞-螺旋板缘、螺旋嵴和螺旋韧带,而毛细胞、血管纹和螺旋神经节染色相对较弱,随着年龄的增长,荧光强度逐渐增加,且在同一个耳蜗内,顶回的染色强度要强于中、底回;HSP70可表达于基底膜、前庭膜、齿间细胞-螺旋板缘、螺旋韧带-螺旋嵴、螺旋神经节等广泛部位,但含量较少,且在同一个耳蜗内同HSF1,顶回染色强于底回;HSP90表达相当广泛,基底膜、前庭膜、螺旋韧带-血管纹、齿间细胞-螺旋板缘及螺旋神经节-神经纤维均有明显的表达,随着年龄的增长,两种热休克蛋白的免疫荧光均逐渐增加。Westernblot结果显示HSF1及HSP90在各年龄组小鼠中均随年龄的增长有增高的趋势,而HSP70可能因为在组织内的含量较低,而未见明显条带。<br>  结论:本研究发现HSF1在C57BL/6J小鼠内耳中主要表达于齿间细胞-螺旋板缘、螺旋嵴和螺旋韧带等部位,且在蛋白质和mRNA水平上均随年龄增长有增高的趋势。HSP70和HSP90在内耳中表达广泛,也均在蛋白质水平上呈现年龄增长性表达增高。HSF1和HSP70在同一个耳蜗内顶回表达高于底回。HSF1、HSP70及HSP90的这种年龄增长性表达增高可能在AHL中起重要的作用。

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