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摘要【目的】<br>　　探讨缬草萜内酯体外对次氮基三醋酸铁溶液诱导的肝星状细胞增殖及表达I型胶原与TGFβ1的干预作用。<br>　　【方法】<br>　　选对数增长期细胞,消化并吹打成细胞悬液,以1×104个/孔接种于96孔培养板,培养至贴壁后倾去培养基,换含有3％小牛血清的DMEM。采用体外实验,将细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组及缬草萜内酯A、B、C组(各有50ug/ml,100ug/ml,200ug/ml,300ug/ml,400ug/ml五个浓度)。除空白对照组之外,其他各组均以0.1mmol/LFeNTA致HSC应激,每孔10ul,缬草萜内酯组均加入不同浓度的A、B、C三种药物各10ul,阳性对照组加入秋水仙碱10ul(0.5ug/ml),空白对照组及模型组加入等量生理盐水,总量100ul/孔。药物作用36h后,光镜下观察细胞数量及形态;MTT比色法检测OD值,计算抑制率。相同操作方法,将细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组及缬草萜内酯C(50ug/ml,100ug/ml,200ug/ml,300ug/ml,400ug/ml)组,药物作用36h后取细胞上清,ELISA法检测I型胶原与TGFβ1的水平。<br>　　【结果】<br>　　1.缬草萜内酯A(400ug/ml、300ug/ml及200ug/ml)组的细胞生长抑制率分别为34.6%、29.3%、19.4%,与模型组比较能显著抑制体外培养HSC的增殖(P<0.01);B(400ug/ml、300ug/ml、200ug/ml及100ug/ml)组的抑制率分别为44.6%、35.2%、23.4%、13.7%,与模型组比较差异显著(P<0.01);C(400ug/ml、300ug/ml、200ug/ml、100ug/ml及50ug/ml)组的抑制率分别为51.9%、43.2%、30.1%、20.2%、10%,与模型组相比差异显著(P<0.01);其它剂量组对比模型组差异不明显(P>0.05)。A(400ug/ml)组、B(400ug/ml与300ug/ml)组、C(400ug/ml、300ug/ml与200ug/ml)组与阳性对照组比较差异有显著性(P<0.01),A(300ug/ml)组及B(200ug/ml)与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),对细胞抑制作用大于秋水仙碱,余浓度组小于秋水仙碱(P<0.01)。模型组与阳性对照组比较差别显著(p﹤0.01)。<br>　　2.缬草萜内酯C与HSC相互作用后,400ug/ml及300ug/ml组(I型胶原含量为90.86±7.62ng/L、119.49±3.32ng/L)与模型组(169.64±12.01ng/L)相比,能显著抑制I型胶原的表达量(p﹤0.01),200ug/ml组(138.32±8.05ng/L)也能降低I型胶原的表达(p﹤0.05),100ug/ml与50ug/ml组与模型组比较差别无意义(p﹥0.05)。与阳性对照组(106.95±4.31ng/L)比较,400ug/ml组明显高于秋水仙碱(p﹤0.01),300ug/ml组差别无意义(p﹥0.05),200ug/ml、100ug/ml及50ug/ml显著低于秋水仙碱组(p﹤0.01)。<br>　　3.缬草萜内酯C与HSC相互作用后,400ug/ml及300ug/ml组(TGFβ1含量为119.62±7.27、137.78±4.03pg/ml)与模型组(155.51±5.56pg/ml)相比,能显著抑制TGFβ1的表达量(p﹤0.01),200ug/ml组(147.04±3.67pg/ml)也能减少TGFβ1的分泌量(p﹤0.05),100ug/ml与50ug/ml组与模型组比较差别无意义(p﹥0.05)。与阳性对照组(143.88±2.21pg/ml)比较,在TGFβ1抑制程度上,400ug/ml组明显高于秋水仙碱(p﹤0.01),300ug/ml组差别有意义(p﹤0.05),200ug/ml组差别无意义(p﹥0.05),100ug/ml组(p﹤0.05)及50ug/ml组(p﹤0.01)低于秋水仙碱。<br>　　【结论】<br>　　1.缬草萜酯A、B、C在不同浓度上对肝星状细胞增殖有不同的抑制作用,随药物浓度增加,药物对HSC的增殖抑制作用逐渐升高,表现出一定的剂量依赖关系。50ug/ml时AB药效相似,其他浓度上,缬草萜酯三种药物效果C﹥B﹥A。<br>　　2.缬草萜内酯C(400ug/ml、300ug/ml、200ug/ml)可抑制活化的HSC分泌I型胶原。<br>　　3.缬草萜内酯C(400ug/ml、300ug/ml、200ug/ml)可抑制活化的HSC释放TGFβ1,减弱HSC的分泌作用。