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摘要肺高压(Pulmonary Hypertension,PH)发病的典型血管病变多由肺动脉平滑肌细胞(pulmonary aterial smooth muscle,PASMCs)内Ca2+稳态失衡所致。先前针对PH发病机制的研究表明,规范性瞬时感受器电位通道蛋白(Canonical transient receptor potential,TRPC)是钙池操纵性钙通(Store-Operated Calcium Channels,SOCC)的分子基础,在慢性低氧(Chronic Hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)大鼠中肺动脉TRPC表达上调、钙池操纵性钙内流(Store-Operated Calciumentry,SOCE)增加。本研究采用野百合碱(monocrotaline,MCT)和慢性低氧(Chronic Hypoxemia,CH)分别诱发大鼠PH,同时将环孢素A(cyclosporin A,CosA)按25mg/kg剂量隔天腹腔注射,正常饲养3w,建立CosA干预MCT和CH致肺动脉高压大鼠模型;另一方面,在MCT和CH模型基础上,分别观察传统中药人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1)和三七皂甙R1(Notoginsenoside R1)对离体肺动脉(pulmonaryarteries,PAs)的舒张作用。为PH的治疗探寻新的靶向治疗药物。<br>　　第一部分，环孢素A对野百合碱和慢性低氧诱发肺高压大鼠模型的治疗作用<br>　　目的:观察CosA干预在MCT和CH大鼠PH的防治作用,及其作用机制,为药物治疗PH寻找新靶点。<br>　　方法:SD大鼠分别采用一次性腹腔注射(50mg/kg)MCT和CH两种方式诱导PH的发生,同时将CosA按25mg/kg剂量隔天腹腔注射,正常饲养3w,建立CosA干预MCT和慢性低氧致PH大鼠模型;测定以下指标:①右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)、平均右心室内压(mean right ventricular pressure,MRVP)、右心室重量指数(Right Ventricular Mass Index Predicts,RVMI);②环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid ,CPA)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱发肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应量效曲线;,③钆离子(gadolinium,Gd3+)对ET-1诱发PAs收缩效应的阻断作用。<br>　　结果:与MCT和CH组相比,CosA干预3w后,①大鼠RVSP、MRVP和RVMI显著下降,HE染色可见肺小动脉平滑肌层增生减弱,肺内小动脉管腔面积与截面积的比值明显增加,肺内小动脉管壁厚度与其半径的比值显著降低,这表明CosA干预3w能预防MCT和CH诱发的PH、肺血管重塑以及右心室肥大;②MCT和CH组大鼠中CPA诱发的PAs收缩显著下降(P<0.01),表明CosA干预下调了SOCE(Store-operatedCa2+entry,SOCE)功能;③MCT和CH组大鼠中ET-1诱发PAs收缩的量效曲线明显右移,表明CosA干预降低了大鼠PAs对ET-1的敏感性。④Gd3+对10nMET-1诱发PAs收缩效应的阻断作用减弱,这亦表明CosA干预下调了SOCE功能。<br>　　结论:CosA干预MCT和CH致PH大鼠模型3w,可预防MCT和CH诱发的PH、肺血管增生、右心室肥大,抑制MCT和CH大鼠肺动脉中SOCE增强介导的肺动脉收缩张力增强,降低ET-1的高反应性。<br>　　第二部分，人参皂甙Rb1和三七皂甙R1对野百合碱和慢性低氧诱发肺高压大鼠模型肺动脉的舒张作用<br>　　目的:分别在MCT和CH诱导大鼠PH模型上,观察传统中药人参皂甙Rb1和三七皂甙R1对PAs张力的调节作用,从而为PH治疗提供新的靶点。<br>　　方法:SD大鼠分别采用一次性腹腔注射(50mg/kg)MCT和慢性低氧两种方式诱导PH的发生(10％O2,正常饲养3w)建立MCT和CH致PH大鼠模型;测定以下指标:①RVSP、MRVP、RVMI;②人参皂甙Rb1和三七皂甙R1对CPA预收缩PH模型大鼠PAs的舒张作用;③人参皂甙Rb1和三七皂甙R1对ET-1预收缩PH模型大鼠PAs的舒张作用及机制。<br>　　结果:①不同剂量人参皂甙Rb1和三七皂甙R1(0.1~100μM)对10nMET-1预收缩正常大鼠肺动脉血管环效应的剂量依赖性舒张作用(Rb1:Emax为36.5±12.3%,EC50=5.93±0.15μM,n=7,P<0.01;R1:Emax为32.5±16.3%,EC50=5.25±0.14μM,n=8,P<0.01)。②在3μM硝苯地平(nifedipine,Nif)预处理情况下:6μM人参皂甙Rb1/三七皂甙R1预处理对10nMET-1引起MCT大鼠PAs收缩效应均有阻断作用(Rb1:P﹤0.05,n=22;R1:P﹤0.05,n=22);6μM人参皂甙Rb1/三七皂甙R1对10nMET-1预收缩CH大鼠PAs效应均有明显的抑制作用(Rb1抑制率:49.8±7.4%,n=14,P<0.01;R1抑制率:35.8±17.4%,n=14,P<0.01);这都提示了人参皂甙Rb1和三七皂甙R1可通过阻断非电压依赖性Ca2+通道介导的钙内流,对PAs产生舒张作用。③6μM人参皂甙Rb1/三七皂甙R1对10μMCPA预收缩两种PH模型大鼠PAs收缩效应均有阻断作用(Rb1:CH组抑制率45.1±18.1%,n=9,MCT组抑制率44.0±11.4%%,n=14;R1:CH组抑制率39.6±17.0%,n=7,MCT组抑制率40.9±11.2,n=14),提示人参皂甙Rb1和三七皂甙R1均可通过部分阻断SOCE,舒张肺动脉血管。④在3μMNif预处理情况下,3nMGd3+阻断10nMET-1预收缩两种肺动脉高压模型大鼠肺动脉血管环效应后,再加入6μMRb1/R1无进一步明显的阻断作用(n=15),提示人参皂甙Rb1和三七皂甙R1舒张PAs的作用主要通过部分阻断SOCE。<br>　　结论:人参皂甙Rb1和三七皂甙R1能部分阻断PAs上SOCC介导的Ca2+信号通路,降低肺血管张力。