换一批摘要【目的】<br> 模拟新生儿出生窒息,建立新生小鼠短暂缺氧性脑损伤模型,研究缺氧对新生鼠认知功能的影响以及神经源性分化因子(NeuroD)侧脑室注射治疗后神经元再生情况,为新生儿围产期窒息所致的缺氧缺血性脑病的防治研究提供实验依据。<br> 【方法】<br> 1.参照Grojean的方法,新生5日龄(5d)小鼠短暂(10min)置于100％氮气环境中,建立出生窒息的模型。采用神经行为学观察、HE染色观察脑组织病理变化等方法,对动物模型进行评价。<br> 2.动物(100只新生5d小鼠)随机分成对照组、缺氧组、缺氧后侧脑室给予NeuroD组、缺氧后侧脑室给予NeuroD Control组,采用RT-PCR检测NeuroD表达量的变化;第6d取材,采用快速冰冻切片的免疫荧光双标法检测BrdU与Doublecortin表达的变化。<br> 【结果】<br> 1.缺氧过程新生小鼠均出现全身紫绀、四肢爬动、意识障碍等神经行为的异常。悬挂实验、悬崖逃避实验和Morris水迷宫实验发现,模型小鼠的智力下降和空间学习记忆功能减退。HE染色可见缺氧10min后海马区神经元损伤严重。<br> 2.RT-PCR结果显示,脑组织中可见NeuroD mRNA表达,但各组间无明显差异。<br> 3.免疫荧光结果显示,在大脑皮质区和海马齿状回可见NeuroD表达,但各组间无明显差异。<br> 【结论】<br> 1.通过将新生小鼠短暂置于100%氮气环境中的方法,可建立与人类新生儿缺氧缺血性脑病相似的新生小鼠短暂缺氧性脑损伤模型。<br> 2.短暂缺氧后侧脑室给予NeuroD后,未见明显的认知改善。
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