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摘要龙须草(Eulaliopsis binata)是近年来在禾本科植物中发现的一种多年生无融合生殖植物,是利用无融合生殖固定禾谷类作物杂种优势的潜在资源。开发与无融合生殖性状连锁的分子标记和确定有性生殖单株是进一步研究其无融合生殖遗传机制的关键。<br>　　本研究采用磁珠富集法开发龙须草新的SSR引物,并利用所开发的SSR引物研究龙须草不同居群和不同单株的遗传多样性,分析龙须草不同居群间杂交后代(F1代),鉴定重点单株的生殖方式,为研究龙须草无融合生殖遗传机制奠定基础。<br>　　主要研究结果如下:<br>　　1.构建微卫星文库。通过文库筛选、测序、分析测序结果,共设计了70对微卫星引物,经PCR检测,发现其中的27对引物具有多态性。<br>　　2.利用8对有扩增差异性的SSR引物分析龙须草11个居群的遗传多样性。共检测到123个等位基因,每对引物可以稳定检测到6-34个多态性片段,而平均每个位点可以检测到15.375个等位基因;这些位点表现出很高的多态信息含量,其值从0.762到0.953,平均值为0.872;居群间遗传相似系数为0.70~0.97之间。根据聚类分析结果,可以将11个居群划分为4个类群,其中来自淅川、丹江、郧县、衡阳、郧西、内乡、西峡、山阳的居群划分为一个类群,而来自星子、百色、洋县的居群各自成为一个群。另外,根据UPGMA法分析的结果,将来自不同居群的71个龙须草单株分为3个类群,这与居群划分的结果基本相符。<br>　　3.使用开发的多态性SSR引物对西峡为母本、星子居群为父本的杂交后代(F1代)进行分子标记检测,结果发现西峡3单株作母本的杂交后代具有父母本的互补带型,表明这个子代是真杂种,其母本可能为有性生殖单株或有性生殖程度较高。<br>　　4.利用流式细胞仪检测西峡居群内各个单株自然结实的种子,结果表明西峡3单株的种子中胚和胚乳细胞的DNA相对含量的倍性比是2C:3C,但是其它单株的倍性比为2C:3C:4C。证明西峡3单株通过有性生殖方式形成种子,而其它单株进行兼性无融合生殖。