ODAM对结直肠癌细胞增殖功能的影响-论文-万方医学网

ODAM对结直肠癌细胞增殖功能的影响

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摘要目的:通过瞬时转染、稳定转染及纯化蛋白等方法,研究ODAM对结直肠癌细胞系HCT8增殖功能的影响,为深入了解结直肠癌的发生发展机制提供理论依据。<br>　　方法:(1)采用实时定量PCR分别检测结直肠癌细胞系HCT8、COLO205、HCT116和SW480中ODAM的mRNA表达水平;(2)利用小RNA干扰片段,瞬时干扰结直肠癌细胞系HCT8后,进行CCK-8实验;(3)构建ODAM干扰及过表达慢病毒载体,筛选稳定转染成功的细胞,分别进行CCK-8实验;(4)构建V152-ODAM重组质粒,采用层析法获取ODAM重组蛋白纯化液,设置浓度梯度进行CCK-8实验。<br>　　结果:(1)ODAM在结直肠癌细胞系HCT8中表达较高,在COLO205、HCT116和SW480中表达较低;(2)瞬时转染干扰成功后,HCT8细胞的增殖能力增加;(3)稳定干扰成功后,HCT8细胞的增殖能力增加;稳定过表达成功后,HCT8细胞的增殖能力降低;(4)ODAM重组蛋白纯化成功后,CCK-8实验结果显示,HCT8增殖能力随ODAM浓度的增大而降低。<br>　　结论:ODAM抑制结直肠癌细胞的增殖能力。