XPD对肝癌HepG2增殖及REDD1基因表达的影响-论文-万方医学网

XPD对肝癌HepG2增殖及REDD1基因表达的影响

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摘要目的:探讨人着色干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)对人肝癌细胞HepG2增殖凋亡及REDD1基因表达的影响。<br>　　方法:实验将重组质粒pEGFP-N2/XPD及空载质粒pEGFP-N2通过脂质体(Lipofectamine2000)介导的瞬时转染方式转入人肝癌细胞HepG2中。实验分为4组,分别为空白组、脂质体组、pEGFP-N2组、pEGFP-N2/XPD组。以基因绿色荧光蛋白在荧光显微镜表达观察转染情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blot)法测细胞中XPD、REDD1基因的mRNA、蛋白质的表达水平;流式细胞仪测细胞凋亡变化;MTT法测细胞增殖。<br>　　结果:荧光显微镜观察到转染了重组质粒pEGFP-N2/XPD及空载质粒pEGFP-N2的细胞绿色荧光,表明转染成功。RT-PCR及Western blot结果显示:与其他3组相比较,XPD组中XPD、REDD1的mRNA及蛋白表达量明显升高(均P<0.01)。MTT法结果示XPD组较其他3组细胞增殖活性显著降低(均P<0.01)。流式细胞仪结果示XPD组细胞凋亡率明显升高达到45％(均P<0.01)。<br>　　结论:XPD能上调抑癌基因REDD1的表达,并能显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖促进其凋亡。