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吡哆胺对糖尿病大鼠视网膜AGEs及其受体基因表达的影响

摘要目的:<br>  研究吡哆胺对糖尿病大鼠视网膜中晚期糖基化终末产物(AGEs)及其受体(RAGE)表达的影响,探讨吡哆胺在保护糖尿病大鼠视网膜中的作用。<br>  方法:<br>  将6周龄(清洁级)雄性SD大鼠以单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发为1型糖尿病。实验大鼠分为4组,①吡哆胺处理组(PM组):STZ注射72h后采用吡哆胺(200mg·kg-1·d-1)灌胃;②氨基胍处理组(AG组):STZ注射72h后采用氨基胍(100mg·kg-1·d-1)灌胃;③对照组(DM组):STZ注射72h后采用蒸馏水(2ml/d)灌胃;④正常对照组(NC组):正常大鼠柠檬酸缓冲液注射72h后采用蒸馏水(2ml/d)灌胃。治疗4周和12周后取大鼠血清和视网膜,采用ELISA法测定AGEs含量,使用免疫荧光染色和实时荧光定量PCR观察视网膜中RAGE的分布和表达情况。<br>  结果:<br>  治疗4周时,ELISA检测各组血清和视网膜AGEs含量结果显示:PM组为2.430±0.096ug/l,2.406±0.118ug/l;AG组为3.360±0.110ug/l,3.324±0.110ug/l;DM组为3.789±0.128ug/l,3.811±0.130ug/l;PM组与AG组和DM组比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗12周时,各组血清和视网膜AGEs含量结果:PM组为2.934±0.061ug/l,2.909±0.055ug/l;AG组为3.888±0.080ug/l,3.812±0.120ug/l;DM组为4.327±0.100ug/l,4.367±0.103ug/l;PM组与AG组和DM组比较差异有统计学意义(P<0.01)。12周时各组AGEs含量比4周时明显增加(P<0.01)。免疫荧光染色检测发现RAGE表达于视网膜色素上皮层至神经节细胞层,治疗4周时OD值分别为PM组1.72±0.04,AG组1.56±0.04,DM组1.30±0.02,PM组与AG组和DM组比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗12周时OD值分别为PM组1.52±0.22,AG组1.37±0.26,DM组1.00±0.02,PM组与AG组和DM组比较差异有统计学意义(P<0.01)。12周时各组RAGE表达量明显高于4周时(P<0.01)。实时荧光定量PCR对RAGE mRNA的检测结果趋势同免疫荧光染色结果一致。<br>  结论:<br>  使用吡哆胺治疗能降低糖尿病大鼠血清和视网膜AGEs的含量,并下调其受体RAGE的表达,减轻二者对视网膜产生的毒性损害,具有保护视网膜的作用。

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