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摘要近年来，手性化合物在生物体内的拆分与检测受到了广泛的关注。由于手性化合物两个对映体的生理活性可能不同，因此，建立准确、快速、灵敏的拆分方法，对手性化合物在体内的药代动力学、药效学和毒理学等研究具有十分重要的意义。而高效液相色谱-化学发光法集高效液相色谱高分离效率和化学发光高灵敏度的优点于一体，成为了一种理想的分离分析手段，被广泛应用于医药、食品、生物、化工等领域。本文将利用高效液相色谱-化学发光法对氨基酸进行手性拆分，并测定生物样品中氨基酸光学异构体的含量，期冀提高氨基酸在生物体内的检测灵敏度。主要研究内容如下：<br>　　一、高效液相色谱-化学发光法测定生物样品中酪氨酸对映体的含量<br>　　实验发现，在碱性环境中，酪氨酸衍生物能增强鲁米诺-高锰酸钾体系的发光信号，基于此，并结合高效液相色谱的手性分离技术，构建了一种高效液相色谱分离，化学发光检测酪氨酸衍生物的新方法。在 C18反相色谱柱，以甲醇-0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（35:65，v:v）为流动相的实验条件下，实现了酪氨酸对映体在生物样品中的手性分离与检测。酪氨酸两对映体血浆样品均在2.5×10-7~3.2×10-5 g/mL浓度范围内与相对化学发光强度呈良好的线性关系（r1=0.9993，r2=0.9992），该方法的检测限分别为2.96×10-8 g/mL，3.59×10-8 g/mL。对浓度为1.0×10-6 g/mL的酪氨酸单一对映体血浆样品进行11次平行测量，其相对标准偏差分别为0.92％，1.09%。该方法简单、选择性好、灵敏度高，已被成功应用于生物样品中酪氨酸单一对映体的含量测定。<br>　　二、高效液相色谱-化学发光法测定生物样品中色氨酸对映体的含量<br>　　本研究基于色氨酸对映体衍生物在碱性介质中能抑制鲁米诺-硫氰化钾的发光强度，建立了一种检测色氨酸对映体的高效液相色谱-化学发光新方法，且已应用于生物样品中色氨酸单一对映体的含量测定。实验分别对流动相的组成及配比、流速、柱温等色谱条件及化学发光体系中各试剂浓度等检测条件进行了考察。在优化好的实验条件下，色氨酸两对映体血浆样品的线性范围均为2.5×10-7~1.2×10-5 g/mL，检测限分别为1.98×10-7 g/mL，2.39×10-7 g/mL。对浓度为2.0×10-6 g/mL的色氨酸单一对映体血浆样品平行测定了11次，相对标准偏差分别为3.24%，3.82%。实验表明该法简便、快速、可靠，适用于生物样品中色氨酸单一对映体的含量测定。<br>　　本研究建立的高效液相色谱-化学发光法简便、可靠、选择性好、灵敏度高，适用于生物样品中氨基酸单一对映体的检测，为日后手性氨基酸的药物代谢动力学研究奠定了基础。该研究不但为氨基酸的手性分离及检测提供了一种思路，而且还拓宽了高效液相色谱-化学发光联用技术的应用范围。