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摘要目的：<br>　　本文主要探讨Hsa-miR-320d（人微小非编码RNA-320d）对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞增殖的影响及分子机制。<br>　　方法：<br>　　1.构建miR-320d过表达和抑制的慢病毒载体，转染DLBCL细胞株OCI-LY1， CCK-8法检测细胞增殖率。<br>　　2.利用生物信息学软件TargetScan、miRanda、miRDB筛选预测可能与miR-320d特异性结合的靶基因并合成其特异干扰序列。<br>　　3.提取OCI-LY1细胞、miR-320d过表达细胞总RNA，应用荧光实时定量PCR技术检测CDK6基因mRNA表达水平；提取OCI-LY1细胞、miR-320d过表达及对照组细胞总蛋白，用Western blotting技术检测CDK6蛋白表达水平。<br>　　4.DLBCL细胞中，分别转染3'UTR-NC+miRNA-NC，3'UTR-NC+miRNA-320d mimic；CDK63'UTR+miRNA-NC， CDK63'UTR+miRNA-320d mimic；CDK63'UTR-MU+miRNA-NC、CDK63'UTR-MU+miRNA-320d mimic。用双荧光素酶报告基因测定试剂法检测酶活性，判断miR-320d是否与CDK6的3’UTR特异性结合。<br>　　5.构建CDK6干扰的慢病毒载体，转染DLBCL细胞株OCI-LY1，CCK-8法观察细胞增殖率，Annexin V/FITC法检测其对细胞凋亡的影响。<br>　　结果：<br>　　1.成功筛选并预测出hsa-miR-320d可能与CDK63’UTR特异性结合，并成功构建miR-320d过表达和抑制以及CDK6干扰的慢病毒载体。<br>　　2.与对照组相比，miR-320d过表达组DLBCL细胞增殖能力减弱（P<0.05）；CDK6抑制组与对照组相比，DLBCL细胞增殖能力减弱（P<0.05）。与对照组相比，尚未发现miR-320d过表达组与CDK6干扰组对DLBCL细胞凋亡率有影响（P>0.05）。<br>　　3.miR-320d过表达组中CDK6 mRNA相对表达值为0.21±0.04,对照组中CDK6 mRNA相对表达值为1.0±0.22，说明转染miR-320d后，可以抑制DLBCL细胞中CDK6 mRNA的表达，而转染通用载体后，DLBCL细胞中CDK6 mRNA的表达无显著变化。miR-320d过表达组中CDK6蛋白表达的相对灰度值低于对照组中的相对灰度值。表明miR-320d可以抑制DLBCL细胞中CDK6蛋白的表达。<br>　　4.实验组的相对荧光素酶活性值为0.37±0.01，对照组值为1±0.06。说明miR-320d与CDK63’UTR特异性结合。<br>　　结论：<br>　　miR-320d过表达可以抑制DLBCL细胞增殖能力，其作用机制与miR-320d抑制CDK6表达进而影响细胞增殖有关，本研究为弥漫大B细胞淋巴瘤基因治疗提供新的思路和方法。