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微小RNA-148a对胃癌细胞MKN-45增殖能力的影响及机制

摘要目的:通过检测比较患者癌组织及癌旁组织中微小RNA(miR)-148a的表达情况,进而分析探讨微小RNA-148a对人胃癌细胞株MKN-45细胞增殖的影响。<br>  方法:采用实时定量 PCR技术检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中miR-148a的表达水平。利用慢病毒包装建立稳定表达miR-148a的MKN-45细胞系为转染组,未转染的MKN-45细胞系为对照组。CCK8法检测胃癌细胞MKN-45的增殖情况,通过targetscan预测miR-148a的靶基因,蛋白印迹法检测靶基因的表达水平。<br>  结果:54例(90.0%,54/60)胃癌组织中 miR-148a的表达量下调,其中37例(61.7%,37/60)下降2倍以上;胃癌组织miR-148a的表达量较癌旁正常组织显著降低(P<0.05);淋巴结转移、癌旁血管浸润及TNM分期III~IV者其表达量明显降低(P<0.05)。转染组miR-148a的表达量明显高于对照组(8.00±1.02比1.00±0.15,P<0.01)。从第3天开始,转染组吸光度值明显低于对照组[(0.978±0.091)比(1.182±0.074),P=0.000]。通过targetscan发现,CDC25可能是miRNA-148a的靶基因;蛋白印迹法显示,转染组的CDC25B蛋白表达较未转染组明显降低。<br>  结论:miR-148a在胃癌中表达明显低于癌旁组织,其并具有抑制胃癌细胞增殖的作用,CDC25B可能是miR-148a发挥抑癌作用的靶基因。

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