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多巴胺对基质金属蛋白酶活性及牙本质胶原降解的研究

摘要目的:<br>  探讨多巴胺对基质金属蛋白酶活性及牙本质胶原纤维降解的影响,以期为多巴胺的临床应用提供实验依据。<br>  方法:<br>  评价多巴胺对基质金属蛋白酶活性的影响:以2mg/ml多巴胺与100u/mlⅦ型胶原酶(基质金属蛋白酶的代表类型之一)混合液为实验组,以去离子水与100u/mlⅦ型胶原酶混合液为阴性对照组,以2mg/ml多巴胺与去离子水混合液为阳性对照组1,以2%氯己定与100u/mlⅦ型胶原酶混合液为阳性对照组2,每组成分混合体积比均为1∶9,每组5个重复样(n=5)。用细胞基质金属蛋白酶总活性比色法检测各组混合15分钟内的酶活性。<br>  评价多巴胺对脱矿牙本质胶原纤维降解的影响:32个牙本质片用37%磷酸酸蚀1分钟,获得脱矿的牙本质片。2个用于扫描电子显微镜观察表面形态,其余30个牙本质片根据随机数字表随机分为3组(n=10)。阴性对照组:牙本质片放入100μl去离子水+900μl胶原酶中;阳性对照组:牙本质片放入100μl氯己定+900μl胶原酶中;多巴胺组:牙本质片放入100μl多巴胺+900μl胶原酶中。3组均放入恒温孵箱(37℃)孵育7d后,通过羟脯氨酸测定试剂盒,检测孵化液中羟脯氨酸含量,计算胶原降解量。同时,选取各组代表性样品通过扫描电镜观察各组牙本质片胶原形态。<br>  评价多巴胺对脱水的脱矿牙本质胶原纤维网形态的影响:将一个牙本质片分为4份,均酸蚀30秒,冲洗。①组:去离子水中5分钟,保持水膜;②组:多巴胺溶液中5分钟,保持水膜;③组:去离子水中5分钟,吹干;④组:多巴胺溶液中5分钟,吹干。然后立即梯度脱水,临界点干燥,通过扫描电镜观察其形态。<br>  结果:<br>  阴性对照组的酶活性及胶原降解量[(0.089±0.011)μmol·min-1和(2836.88±200.71)μg/cm2]均显著高于阳性对照组2[(0.038±0.006)μmol·min-1和(1288.47±171.78)μg/cm2]和多巴胺组[(0.030±0.009)μmol·min-1和(1388.93±254.80)μg/cm2](P<0.05),阳性对照组2与多巴胺组间差异无统计学意义(P>0.05)。<br>  场发射扫描电镜显示多巴胺组和阳性对照组胶原纤维网结构完整,而阴性对照组胶原破坏,结构不完整。多巴胺处理后的脱矿牙本质片,在吹干后仍可保持胶原纤维蓬松状态。<br>  结论:<br>  多巴胺可抑制基质金属蛋白酶活性以及脱矿的牙本质胶原降解,对脱矿的牙本质胶原纤维网形态具有一定的维持作用。

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