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摘要目的：肺癌是世界上死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占肺癌总数85％左右。已有大量文献报道白介素-6（IL-6）是NSCLC中关键的肿瘤促进细胞因子。前期研究发现雌激素主要通过雌激素受体β（ERβ）在NSCLC的进展中起重要促进作用。已有研究证实雌激素与 IL-6信号通路相互作用，协同促进乳腺癌、卵巢癌等雌激素靶器官肿瘤的进展。但在雌激素非靶器官肺癌中雌激素和 IL-6有无相互作用还未见报道，雌激素是否能够调节NSCLC细胞IL-6的分泌还不得而知。本研究首先检测ERβ与IL-6在NSCLC组织中的表达和相关性，然后在体外实验中探讨NSCLC中雌激素对IL-6分泌的调控及其可能的机制，为NSCLC内分泌和免疫治疗策略提供新的理论基础和方向。<br>　　方法：本课题分两部分进行研究：<br>　　第一部分在人NSCLC组织中检测ERβ和IL-6的表达，分析其表达相关性和共表达与临床病理特征的关系。应用组织芯片技术和免疫组化方法，检测2012年2月-2014年2月我院手术的103例NSCLC肿瘤组织和98例癌旁正常肺组织中 ERβ和 IL-6的表达。应用卡方检验分析 ERβ和 IL-6表达与NSCLC临床病理特征的相关性，用Spearman等级法分析ERβ和IL-6之间表达的相关性。<br>　　第二部分在体外实验探讨NSCLC中雌激素通过ERβ对IL-6分泌的影响及其可能的机制：1.NSCLC细胞系A549分别给予不同浓度梯度（1nM,10nM,100nM）17β-雌二醇（17β-estradiol，E2，ER配体）处理，用ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量，以探讨IL-6分泌是否与雌激素浓度相关；2.将NSCLC细胞系A549分为7组：空白对照（con）组、E2组、PPT（ERα特异性激动剂）组、DPN（ERβ特异性激动剂）组、氟维司群（Fulvestrant，Ful，雌激素抑制剂）组、E2+Ful组、DPN+Ful组，ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量，Western-blot检测细胞内IL-6表达，以探讨雌激素通过ERβ调节IL-6分泌和表达；3.将NSCLC细胞系A549分为6组处理：空白对照（con）组、E2组、Ful组、E2+Ful组、E2+IL-6组、 E2+Ful+IL-6组，检测细胞增殖（CCK8），以探讨雌激素上调IL-6分泌对细胞增殖能力的影响；4.将NSCLC系A549分为6组处理：con组、E2组、Ful组、E2+Ful组、E2+Ful+MAPK抑制剂（U0126）组、 E2+Ful+PI3K（LY294002）抑制剂组，Western-blot分别检测t/pMAPK、t/pAkt的表达，ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量，以探讨雌激素上调IL-6分泌的可能机制。<br>　　结果：通过组织芯片-免疫组织化学技术检测发现：NSCLC中ERβ表达阳性率为91.3％(94/103)，癌旁正常肺组织中ERβ表达阳性率为57.1％(56/98)，NSCLC中ERβ显著过表达。在NSCLC中IL-6表达阳性率为89.3％(92/103)，癌旁正常肺组织中IL-6表达阳性率为42.9％(42/98)；NSCLC中IL-6显著过表达。NSCLC中ERβ1、IL-6共表达阳性率为82.5％(85/103)，显著高于癌旁正常肺组织中ERβ、IL-6共表达阳性率22.4％(22/98)。Spearman等级法分析ERβ与IL-6表达有正相关性，尤其在肺鳞癌中ERβ表达与IL-6表达有显著相关性。<br>　　在体外实验中发现：1. NSCLC细胞系A549给予不同浓度梯度E2，细胞培养上清中IL-6的含量随E2浓度的增加而增加，E2诱导的促IL-6分泌作用可被其受体阻断剂氟维司群(ful)阻断，提示雌激素能够促进肿瘤细胞分泌IL-6；2.E2、DPN促进细胞内IL-6蛋白的表达和培养液中IL-6分泌，E2+Ful、DPN+Ful组细胞内IL-6表达和上清IL-6分泌较E2、DPN组明显下降，同时发现PPT组IL-6蛋白的表达和培养液中IL-6分泌与对照组无明显差异，提示雌激素通过ERβ调节IL-6分泌和表达；3.细胞增殖的能力在E2组中较对照组明显增强，E2+IL-6组细胞增殖能力较E2组增强，加入Ful后E2的促进增殖作用被抑制，提示雌激素可能通过上调IL-6分泌促进细胞增殖；4. pMAPK、pAkt在E2组表达升高，在E2+Ful、E2+Ful+MAPK抑制剂、 E2+Ful+Akt抑制剂组中下降，同时发现培养液上清中IL-6的含量在E2+Ful、E2+Ful+MAPK抑制剂、 E2+Ful+Akt抑制剂组下降，提示雌激素通过ERβ激活MAPK和Akt通路上调IL-6分泌。<br>　　结论：在这项研究中发现，ERβ与IL-6在NSCLC组织中存在过表达，ERβ表达与IL-6的表达在NSCLC组织中具有正相关。雌激素能够通过ERβ促进NSCLC细胞IL-6分泌，进而促进NSCLC细胞增殖，其机制可能与激活MAPK和Akt信号通路有关，因此认为ERβ可能通过激活IL-6免疫信号通路而在NSCLC发生发展中发挥重要作用，这可能是雌激素促进NSCLC进展的重要机制之一，更进一步的深入研究有利于揭示其在NSCLC内分泌和免疫治疗策略中的潜在价值。