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摘要目的：研究细胞外基质磷酸糖蛋白（MEPE）在前列腺癌细胞中的表达水平对前列腺癌细胞迁移能力的影响，以及MEPE蛋白影响细胞迁移能力的机制与小G蛋白家族蛋白PI3K/Rac1/PAK1通路的关系。为阐明肿瘤浸润及转移机制提供实验依据。<br>　　方法：构建腺病毒包装质粒pYr-ads-4-mMEPE与pYr-ads-4-siMEPE，在HEK293细胞中包装形成腺病毒颗粒，分别转染正常前列腺上皮细胞株RWPE1与前列腺癌细胞株PC3，同时转染空质粒作为对照细胞株。免疫印迹检测转染细胞株中MEPE蛋白表达水平，确定转染效果。通过经典的划痕实验、Transwell侵袭/迁移实验对比人为上调或下调MEPE蛋白表达水平的细胞株以及其对应的空载体的细胞株之间侵袭/迁移能力的差异。进一步采用免疫印迹方法检测MEPE蛋白表达水平不同的各个细胞株内信号通路PI3K/Rac1/PAK1的信号蛋白表达水平是否也随之改变。<br>　　结果：⑴经酶切与测序验证，pYr-ads-4-mMEPE与pYr-ads-4-siMEPE重组质粒构建成功，免疫印迹分析验证转染rAd-4-mMEPE的RWPE1细胞株中MEPE蛋白表达水平上调，转染rAd-4-siMEPE的PC3细胞株中MEPE蛋白表达水平下调，而转染相应空载体的细胞株中MEPE蛋白的表达水平与野生型细胞株一致，说明腺病毒质粒构建成功可在真核细胞表达。⑵通过划痕实验分别在0h与48h观察转染rAd-4-mMEPE的RWPE1细胞株、转染rAd-4-siMEPE的PC3细胞株以及其对照细胞株细胞迁移情况，MEPE蛋白表达水平高的细胞株迁移率分别为83％、56%，空载体对照细胞迁移率为68%、79%，实验结果表明MEPE蛋白表达水平高的细胞株细胞迁移能力明显增强。⑶Transwell实验观察到转染rAd-4-mMEPE的RWPE1细胞株迁移率比对照细胞株增加了15%，转染rAd-4-siMEPE的PC3细胞株迁移率比对照细胞株下降了23%。实验结果表明MEPE蛋白表达水平高的细胞株细胞迁移能力明显增强。⑷免疫印迹分析结果显示，转染rAd-4-mMEPE的RWPE1细胞株、转染rAd-4-siMEPE的PC3细胞株以及其对照细胞株中PI3K与Rac1的信号蛋白表达水平也随MEPE表达水平改变而改变。在RWPE1细胞中其中随着MEPE蛋白表达水平增高，PI3K与Rac1表达水平也升高，在MEPE蛋白表达水平较低的转染rAd-4-siMEPE的PC3细胞株与转染空载体的RWPE1细胞株中，PI3K与Rac1表达水平较低，actin的表达水平未见明显变化，转染MEPE的RWPE1细胞中PAK1蛋白表达量没有增加，但转染PC3-si-hmepe细胞中PAK1蛋白表达量比转染空载体PC3细胞表达量明显下降。<br>　　结论：①MEPE蛋白表达水平影响前列腺癌细胞株的侵袭/迁移能力。②MEPE蛋白参与前列腺癌细胞株迁移活动机制与PI3K/Rac1/PAK1信号通路相关。