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瘦素诱导STAT3对卵巢癌SKOV3细胞中TERT影响机制的研究

摘要目的:<br>  检测瘦素对上皮性卵巢癌SKOV3细胞的增殖效应,探讨STAT3siRNA干扰阻断JAK/STAT3通路后,瘦素对卵巢癌SKOV3细胞中TERT的影响机制。试图了解瘦素对卵巢癌发生发展的影响及其机制,为提高卵巢癌的早期发现及手术预后治疗提供新的理论依据,为卵巢癌寻找新的肿瘤标记物和基因治疗靶点。<br>  方法:<br>  (1)通过MTT细胞增殖实验检测瘦素对上皮性卵巢癌SKOV3细胞系的增殖效应,并测定出促使细胞增殖的最佳瘦素作用浓度和最佳作用时间。<br>  (2)实验分三组即空白对照组(仅含SKOV3细胞),STAT3siRNA转染后的SKOV3细胞组、阴性对照的N-control转染的SKOV3细胞,每组分别设两个复孔,接种于6孔板上,置于37℃、5%CO2条件的培养箱内进行培养,应用RT-PCR检测三组实验分组细胞内目的基因STAT3mRNA水平上的表达差异。<br>  (3)实验分四组即空白对照组(仅含SKOV3细胞),siRNA转染后的SKOV3细胞组、瘦素+siRNA转染后的SKOV3细胞组、瘦素+SKOV3细胞组,每组分别设两个复孔,接种于6孔板上,置于37℃、5%CO2条件的培养箱内进行培养,应用RT-PCR检测四组实验分组细胞内两个目的基因STAT3和TERT在mRNA水平上的表达差异。<br>  (4)用SPSS13.0软件对所得数据进行处理,采用随机区组方差分析等统计学方法对数据进行统计学分析。<br>  结果:<br>  (1)经MTT细胞增殖实验检测后,瘦素诱导上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖的最佳瘦素浓度是100ng/ml,最佳作用时间为48小时。<br>  (2)转染实验的三组细胞通过RT-PCR检测发现STAT3siRNA转染后的SKOV3细胞组中STAT3的mRNA表达水平较空白对照组及阴性对照的N-control转染的SKOV3细胞组下降明显,P值<0.05有统计学意义。<br>  (3)瘦素实验四组细胞通过RT-PCR检测发现瘦素+SKOV3细胞组STAT3和TERT在mRNA水平上的表达均高于其它三个实验细胞组,且明显高于瘦素+siRNA转染后的SKOV3细胞组,而瘦素+siRNA转染后的SKOV3细胞组与siRNA转染后的SKOV3细胞组比较两个目的基因的表达未见明显差异。<br>  结论:<br>  (1)瘦素对卵巢癌SKOV3细胞具有增殖效应,且随着瘦素浓度及作用时间的增长具有一定的依赖性。<br>  (2)瘦素诱导JAK-STAT3信号传导通路促进上皮性卵巢癌SKOV3细胞中STAT3及TERT的表达增加,通过JAK-STAT3信号传导通路影响TERT的表达,可能对卵巢癌的发生发展起到一定的促进作用。

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