检索历史 清除

摘要糖尿病（Diabetes mellitus，DM）是一种全球性的内分泌代谢疾病，表现在因胰岛素分泌不足而引起的糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱及体内酸碱失衡，以血糖水平升高为主要特征。另外，糖尿病还经常伴随着诸如糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）、糖尿病肝病（Diabetic hepatopathy，DH）和糖尿病胰腺疾病（Diabetic-pancreatic disease，DPD）等并发症的发生，致残、致死率高。目前，临床中糖尿病的治疗方法包括注射胰岛素和口服降血糖药物，但这些方法在长期使用中会产生毒副作用，因此，寻找天然的、无毒的降血糖药物是非常必要的。<br>　　红平菇（Pleurotus djamor），又名桃红侧耳、红侧耳等，是一种食用、药用兼有观赏价值的珍稀蕈菌。但是目前关于红平菇的研究较少，未见菌丝体多糖（Mycelia polysaccharides，MPS）的提取及抗糖尿病药理活性的报道。<br>　　本课题以红平菇为出发菌株，进行红平菇深层液体发酵获得菌丝体。通过单因素实验（Single-factor test，SFT）和响应面分析（Response surface methodology，RSM）等方法确定了红平菇酸提 MPS（Acidic-extractable MPS，Ac-MPS）、碱提 MPS（Alkalic-extractable MPS，Al-MPS）和酶提MPS（Enzymatic-extractable MPS，En-MPS）的最佳提取条件，并对三种红平菇MPS的结构和抗糖尿病及其并发症的生理活性进行研究，以期为从天然资源中开发和研究新物质提供参考，为临床糖尿病的药物治疗提供新的线索。目前主要获得以下研究成果。<br>　　（1）红平菇MPS的提取优化：参考现有的提取技术，优化红平菇 MPS的提取工艺。结果表明①Ac-MPS的最佳提取条件是加水倍数37.25，提取时间42.95min，HCl浓度0.20M，提取温度83.98oC，此条件下得率为1.97％；②Al-MPS的最佳提取条件是加水倍数41.56，提取时间88.91min，NaOH浓度0.36M，提取温度74.90oC，此条件下得率为2.36%；③En-MPS的最佳提取条件是 pH值7.36，加水倍数56.78，提取时间44.77min，提取温度35.36oC，此条件下得率为3.61%。上述提取过程中方差分析、满意度分析、准确度分析及异常值分析均表面模型可适用于Ac-、Al-和En-MPS工艺条件的参数优化。<br>　　（2）红平菇MPS的结构测定：①气相色谱图表明，Ac-MPS和Al-MPS均含有阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖，但单糖含量存在差异；En-MPS含有鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖；②液相色谱分析显示，Ac-、Al-和En-MPS的重均分子量（Weight-average molecular weights，Mw）分别为2.33×104Da、5.26×104Da和1.97×104Da，其它分子量参数大小顺序为 Al-MPS>Ac-MPS>En-MPS，多分散系数 d大小顺序为Al-MPS>Ac-MPS>En-MPS，表明En-MPS多糖较均一；③红外光谱结果显示，Ac-MPS是α-型糖苷键连接的呋喃糖，Al-MPS是β-型糖苷键连接的呋喃糖，En-MPS是β-型糖苷键连接的吡喃糖。<br>　　（3）红平菇MPS对糖尿病小鼠氧化应激的影响：Ac-、Al-和En-MPS均能显著抑制链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱导的糖尿病小鼠肝脏、肾脏和胰腺中的超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）和总抗氧化能力（Total antioxidant capability，T-AOC）活性的降低及脂质过氧化物（Lipid peroxide，LPO）和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量的升高，表明Ac-、Al-和En-MPS具有较强抵制氧化应激的活性。并且结果表明，与Ac-MPS和Al-MPS相比，En-MPS表现出更强的活性。<br>　　（4）红平菇MPS对糖尿病小鼠脂代谢的影响：Ac-、Al-和En-MPS能显著抑制糖尿病小鼠血清中甘油三酯（Triacylglycerols，TG）、总胆固醇（Total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（Very low-density lipoprotein cholesterol，VLDL-C）和动脉粥样硬化指数（Atherogenic index，AI）水平的升高和高密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）水平的降低，表明红平菇MPS能够改善小鼠的脂代谢紊乱情况。<br>　　（5）红平菇MPS对糖尿病小鼠器官的修复作用：Ac-、Al-和En-MPS可显著降低小鼠血清中的谷丙转氨酶（Alanine transaminase，ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase，AST）、尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（Creatinine，CRE）的水平，可显著抑制 STZ诱导的器官指数的升高；小鼠肝脏、肾脏和胰腺的外观及组织病理学切片也随着红平菇MPS的干预而逐渐趋于正常。并且En-MPS的作用效果要强于Ac-MPS和Al-MPS，说明En-MPS有保护肝脏、肾脏和胰腺免受高血糖的影响。<br>　　上述结果表明Ac-、Al-和En-MPS能改善STZ诱导糖尿病小鼠的糖代谢和脂代谢，减轻氧化应激对机体的损伤，防治糖尿病并发症的发生发展。说明红平菇MPS药性缓和、无毒副作用，可开发其并应用于保健食品，具有广阔的市场前景。