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费约果叶片生物活性物质分析及原花青素分离纯化工艺的研究

摘要费约果(Feijoa sellowiana Berg.),又名菲油果、肥吉果,是桃金娘科菲油果属常绿灌木或小乔木,原产于南美洲的巴西和乌拉圭。大量研究结果表明:费约果的叶片、种子、果皮、果肉等组织中含有丰富的营养活性成分,因此具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、护肝益肾、护肤美容等作用,是一种具有很大开发潜力的药用保健资源。<br>  本文选取了胜利‘Triumph’、唯一‘Unique’、毛象‘Mammoth’和库立激‘Coolidge’四个费约果品种,对其四个发育时期(分别是成熟叶片大小的20%,40%,90%,100%)叶片的生物活性物质含量及抗氧化能力进行分析;并在此基础上探讨大孔树脂分离纯化费约果叶片原花青素的最佳工艺条件。实验结果如下:<br>  1.叶片发育阶段显著影响费约果叶片生物活性物质含量和抗氧化能力,而基因型对其影响无显著差异。在四个品种费约果叶片发育过程中,20%发育阶段的叶片总酚、总黄酮和原花青素含量和抗氧化能力最高,之后随叶片发育成熟呈逐渐降低的趋势,而鞣花酸在20%和90%叶片发育阶段含量最高。<br>  2.相关性分析表明费约果叶片总酚、总黄酮、原花青素的含量与抗氧化能力呈极显著正相关(P<0.01),而抗坏血酸与抗氧化能力之间呈显著负相关(P<0.05)。由此说明总酚、总黄酮、原花青素在费约果叶片抗氧化能力方面发挥重要作用。<br>  3.通过比较HPLC与分光光度法测定原花青素含量结果,结果显示:HPLC法测定原花青素的含量远低于紫外分光光度法的测定结果。究其原因推测盐酸正丁醇法测定原花青素选择性高,包含原花青素二聚体、三聚体、多聚体等均参与反应,而HPLC法测定原花青素二聚体含量具有特定性,可以排除不同聚合原花青素的干扰,因此测定结果偏小。<br>  4.通过对费约果叶片中原花青素静态吸附-解吸实验,在五种大孔树脂AB-8、X-5、D101、S-8、D3520中筛选出AB-8大孔树脂做为层析柱填料。进一步通过大孔树脂AB-8动态吸附-解吸实验,对上样液pH、洗脱剂、上样流速、柱径高比、洗脱剂流速等因素进行筛选,通过测定得率与样品纯度等指标,找到大孔树脂分离纯化费约果叶片原花青素最佳工艺条件:上样液pH为4,洗脱剂为60%乙醇溶液,上样流速为2ml/min,最大上样量与大孔树脂质量比为20∶1(v/m),柱径高比为1∶6,洗脱液流速为1ml/min,洗脱剂用量为4.3BV(BV表示柱体积)。检测分离纯化物中原花青素的回收率为87.3%,纯度达到44%。

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导师 罗娅张猛
发布时间 2015-05-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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