低能N<'+>注入L-Ile产生菌诱变选育及发酵条件研究-论文-万方医学网

低能N<'+>注入L-Ile产生菌诱变选育及发酵条件研究

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摘要离子注入用于微生物诱变可以在损伤轻的情况下,获得较高的突变率和较宽的突变谱,而且在一定程度上能克服菌种对传统诱变源的的抗性饱和等优点. 通过对L-异亮氨酸产生菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum).AS1.998进行N<'+>离子注入,结合紫外线诱变及乙硫氨酸抗性筛选,筛选出诱变菌株.N24..其L-异亮氨酸产量由原来0.446g/100ml提高到0.642g/100ml,高出出发菌株43.95﹪,突变株具有良好的遗传稳定性. 运用单因素法及正交试验法对突变菌株N24摇瓶发酵的种子培养基、发酵培养基进行了优化.种子培养基为:葡萄糖7﹪,玉米浆1.8﹪,蛋白胨0.5﹪,KH<,2>PO<,4>0.1﹪,MgSO<,4> 0.05﹪,尿素O.4﹪(单灭).发酵培养基为:葡萄糖12﹪,(NH<,4>)SO<,4> 6﹪,K2HPO<,4> 0.06﹪,玉米浆1.0﹪,麸皮水解液1.0﹪ .采用优化种子及发酵培养基,突变株.N24的L-异亮氨酸产量达0.744 g/100ml,较原培养基的0/642g/100ml提高了15.89﹪. 对突变菌株N24摇瓶发酵条件进行优化,在初始pH7.2, CaCO<,3>调节pH,接种量10﹪,装液量25ml/500ml, 转速200rpm,28℃条件下,发酵72h,L-异亮氨酸产量达到0.775g/100ml,较原培养条件提高了4.17﹪. 突变株N24在优化发酵培养基及发酵条件下, L-异亮氨酸产量达到0/775g/100ml,较出发菌株的0.446g/100ml提高了73.77﹪,并具有良好的遗传稳定性.