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摘要目的：研究和评价外周血T细胞亚群、骨髓T淋巴细胞内IFN-γ表达和Th<,1>/Th<,2>及Tc<,1>/Tc<,2>比值以及HLA-DRBl*1501表型等指标的不同组合在再生障碍性贫血(AA)患者免疫抑制疗法(IST)疗效预测中的敏感度和特异度，初步确定其临床应用价值；研究和分析骨髓T淋巴细胞内IFN-γ染色与HLA-DRBl*1501表型联合检测在IST疗效预测中的临床应用价值；研究和探讨建立一个以临床、免疫学功能指标和遗传学指标为基础的多变量再障IST疗效预测模型的可行性。 方法：51例接受含环孢菌素A的IST方案治疗的原发性AA患者入选，其中男性30例，女性21例：中位年龄32岁(12岁～79岁)：重型(SAA)42例(82.4﹪)，包括8例(15.7﹪)极重型(VSAA)患者，非重型(NSAA)9例(17.6﹪)；初治患者39例(76.5﹪)，既往治疗过的患者12例(23.5﹪)；对IST反应良好的患者35例(68.6﹪)，无效16例(31.4﹪)：单用CsA治疗的35例(68.6﹪)，CsA+ATG/ALG治疗的16例(31.4﹪)，无单用．ATG/ALG治疗的患者。患者治疗前流式细胞术(FCM)检测外周血CD3<'+>、CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴细胞亚群、骨髓CD4<'+>和CD8<'+>细胞内IFN-γ、IL-4以及Th<,1>/Th<,2>、Tc<,1>/Tc<,2>，经随访观察判定疗效，比较不同疗效反应的患者上述各项指标的差异，比较不同疗效患者治疗前后上述指标的变化，评价和比较上述免疫指标在AA患者IST疗效预测中的应用价值。患者治疗前外周血提取DNA，以PCR-SSP法检测HLA-DRBl*1501表型，分析骨髓T细胞内IFN-γ染色与HLA-DRBl*1501联合试验与AA患者IST疗效的关系，评价联合试验在AA患者IST疗效预测中的潜在应用价值。通过上述分析研究，选择对患者疗效反应预测价值相对较高的免疫学和遗传学指标，结合反映患者病情严重程度的临床指标建立一个多变量模型，分析和探讨多项观察指标的组合在AA患者IST疗效预测中的潜在应用价值。 结论： ①本研究应用转译性研究方法，对目前临床上常用的和具有临床应用潜能的IST疗效预测指标进行了研究和评价，结果证实反映患者免疫功能受损的免疫学指标检测是原发性AA患者IST疗效预测的关键环节，不同的免疫指标检测在预测AA患者IST疗效中的意义各不相同。FCM检测骨髓T细胞内IFN-γ操作简便、实用性强，在所评价的免疫功能指标中，敏感性和特异性最好，特别是CD8<'+>细胞内IFN-γ定性和定量实验对AA患者IST疗效的预测价值最高。对于初治患者来说，细胞内IFN-y染色具有很强的阴性排除性诊断价值，但缺点是对于占原发性AA大多数的、细胞内IFN-~阳性的患者来说，预测价值有限。仅凭Th<,1>/Th<,2>和Tc<,1>/Tc<,2>数值的高低不能预测IST疗效，但如果结合细胞内IFN-γ染色的定性实验，则可对判断预后有重要意义，CD8<'+>细胞内IFNw阳性且Tc<,1>/Tc<,2><50预示患者有更多的机会通过IST治疗而获得缓解，两者的结合有助于补充单独细胞内IFN吖染色适用范围狭窄的缺点。虽然外周血CD4<'+>和CD8<'+>细胞数量和比值及其变化与患者对IST疗效反应以及不同疾病状态有一定联系，但CD4<'+>/CD8<'+>倒置作为疗效预测指标缺乏必要的敏感性和特异性，缺乏临床应用前景。 ②骨髓T细胞内IFN-7和HLA-DRBl*1501表型联合检测可以作为预测AA患者IST疗效的、具有临床实用价值的一种指标，联合检测能弥补单一HLA-DRBl*1501表型检测灵敏度差的缺陷，并有助于提高骨髓T细胞内IFN-γ染色预测IST疗效的特异度。串联试验阳性预测IST治疗有效的准确性更强，这对于大多数细胞内IFN-γ阳性的原发性AA患者来说有重要意义。骨髓T细胞内IFN-γ和HLA-DRBl*1501双阳性和细胞内IFN-γ阳性伴HLA-DRBl*1501阴性的患者都预示对IST治疗有效，但前者有效的可能性高于后者。更重要的是，这两种实验技术条件成熟，方法简便，适合临床快速检验的要求，所得到的四种检测结果的组合能帮助临床医生快速地对患者治疗有效的概率做出初步判断，该联合检测方法为临床提供了一种有效且方便的IST疗效预测方法。 ③本研究首次提出并探讨了以临床、免疫学和遗传学指标为基础建立一个多变量再障IST疗效预测模型的可行性，这种多变量模型的建立有助于多层次地分析患者的个体差异，这种差异可能在一定程度上代表了异质性患者某种占居主导地位的发病机制和遗传学特质，可以弥补单变量指标在疗效预测的准确性上的不足，使之更加适应临床复杂性的要求，因而具有潜在的临床应用价值。