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UV-B诱导植物DNA损伤和紫外吸收化合物形成的研究

摘要大气臭氧层耗损导致到达地球表面的UV-B辐射逐渐增加,植物需要接受太阳光进行光合作用,因而不可避免地受到阳光中增强的UV-B辐射的影响。UV-B辐射对植物的次生代谢物质代谢有重要的影响,尤其是对苯丙酸代谢途径的调节作用。该途径的产物——类黄酮化合物具有强烈的UV-B吸收作用,是植物体内的UV-B保护物质。本研究利用高效液相色谱法(HPLC)分析了UV-B辐射对紫萍紫外吸收化合物积累的影响,发现某些种类的紫外吸收化合物经UV-B辐射后含量增加,而另一些种类含量降低或者不变。与传统的紫外分光光度法相比,该方法简便、有效、精确,为本课题组开展植物紫外吸收化合物的生物合成和作用研究奠定基础。 单细胞凝胶电泳(彗星检测)已广泛应用于动物细胞DNA损伤检测。本论文报道了单细胞凝胶电泳技术应用于UV-B诱导的植物细胞DNA损伤的检测。通过对动物细胞的单细胞凝胶电泳实验方法的改进,获得了在植物细胞中应用的最佳条件。以植物细胞原生质体为材料,并结合T4 EndonuleaseV的运用,显著提高了UV-B诱导植物细胞DNA损伤彗星检测的敏感性和特异性。植物细胞DNA损伤的彗星图像经CASP软件处理并量化,结果表明:UV-A和UV-B均能诱导发生DNA单链断裂;UV-A在一定的剂量下能诱导少量嘧啶二聚体的形成,而UV-B则强烈诱导嘧啶二聚体的产生。 利用改进后的单细胞凝胶电泳技术,研究了不同发育期九里香(Murrayapanicuata)叶片对UV-B诱导的DNA损伤的敏感性差异。彗星检测结果表明,九里香叶片DNA的损伤程度与UV-B辐射的剂量呈正相关;在相同UV-B辐射剂量的情况下,九里香幼嫩叶片的:DNA损伤量比成熟叶片的大,表明其幼嫩叶片对UV-B辐射的敏感性比成熟叶片高。

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