损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为肝细胞的研究-论文-万方医学网

损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为肝细胞的研究

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摘要成体干细胞跨越分化为其它组织类型细胞的研究已成为当前干细胞研究的新热点，它不仅对探索细胞分化发育的机制具有重要的理论意义，而且为临床细胞移植治疗开辟了新的途径。作为最重要的成体干细胞之一，骨髓来源的干细胞分化研究倍受重视，以往的研究表明，它们具有较强的可塑性，能够分化成神经细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、上皮细胞和胰岛细胞。近年来，Petersen等进一步发现，在CC14致肝脏损伤的微环境下，移植的骨髓细胞能够分化成为肝卵圆细胞甚至成为成熟的肝细胞和胆管细胞。然而，由于体内研究背景的复杂性，目前这种跨越分化的机制尚不清楚，这就需要建立相关的体外分化技术进行研究。另外，骨髓中存在能分化为肝细胞的干细胞虽已成定论，但究竟是其中的几个亚型还是所有的骨髓细胞均可分化为肝细胞仍值得研究。本文将注射过CC14的小鼠肝脏进行培养，收集损伤肝脏条件培养液，添加到培养液中以模拟体内肝损伤微环境，诱导间充质干细胞的分化。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光反应检测各组细胞中甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)、酪胺酸胺基转移酶(TAT)和白蛋白(ALB)基因的表达，并利用高碘酸希夫反应检测细胞糖原合成。结果显示损伤肝脏条件培养液可以成功诱导骨髓间充质干细胞体外分化成肝细胞。从而为骨髓间充质干细胞跨越分化为肝细胞的机制研究打下基础，同时也为体外利用骨髓细胞分化为肝细胞的相关临床应用研究，建立新的技术方法。