检索历史 清除

摘要中心体是一种重要的细胞器。中心体由一对中心粒(centriole)、中心粒之间的连接物质(the connection between centtrioles)以及中心粒周围物质(pericentriolar material，PCM)三部分组成。它的主要功能是作为细胞微管组织中心，在细胞有丝分裂期建立起纺锤体的两极来确保复制的染色体忠实地精确地平均分配到两个子细胞中，从而维持基因组的稳定性。丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora-A在细胞有丝分裂期从的S期早期到G2/M期定位在中心体的PCM区域，并参与调节中心体和微管的功能，确保染色体的忠实分离及胞质分裂的顺利完成<'5,122>。 Aurora-A基因定位在染色体20q13.2区域，该区域在多种肿瘤中扩增<'123-126>。在胃癌、膀胱癌、前列腺癌、结直肠癌、神经胶质瘤和肝癌中,均检测到Aurora-A基因在DNA水平扩增或者在蛋白、mRNA水平高表达<'28-35>。外源高表达的Aurora-A可以转化NIH3T3和Ratl细胞，表达组成性活化Aurora-A的NIH3T3细胞和表达野生型Aurora-A的Ratl细胞都可以在裸鼠体内形成肿瘤<'26,28>。最近有研究表明：Aurora-A可增加转基因小鼠的乳腺癌发生率<'127>。因此，Aurora-A可认为是一个癌基因(oncogene)。 在中国，食管癌是死亡率排名第四的常见恶性肿瘤。但是，其确切发病机理仍然不清楚，有待于进一步研究。染色体20q的扩增在食管癌中十分常见<'128-132>，已有研究表明Aurora-A在食管癌中表达升高<'39-40>，尽管Aurora-A基因定位在染色体20q13.2区域，然而，迄今未见检测食管癌组织中Aurora-A DNA的拷贝数的研究报道。为了探讨Aurora-A在食管癌中的可能作用，本研究首先在食管癌标本中检测了Aurora-A的DNA以及蛋白、mRNA的状态，结果显示Aurora-A不仅在蛋白、mRNA水平高表达，同时在DNA水平表现出基因扩增。 为了更好地研究Aurora-A在肿瘤发生中的作用，本研究构建了Aurora-A的四环素诱导表达细胞系，293-TR-Aur-myc。经诱导高表达的Aurora-A能够促进细胞生长以及平板克隆形成能力，并且，高表达Aurora-A的细胞可形成转化灶和在软琼脂中形成集落。过表达Aurora-A显著增加细胞染色体水平的不稳定性。在一定时间内，随着Aurora-A诱导表达时间的延长，中心体数目发生异常增多的细胞数也随之增加；染色体计数方法显示Aurora-A过表达使得细胞染色体数目也发生异常改变；比较基因组杂交方法检测，扩增和缺失的基因数目随着诱导时间的延长而增多。