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摘要一、套细胞淋巴瘤(MCL)是一种预后差，临床治疗具有挑战性的恶性淋巴瘤。阿替莫德(Atiprimod)是刚离子两性分子复合物，它可抑制多种人类肿瘤细胞系的增殖。本研究的目的是阐明Atiprimod治疗MCL、诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。 方法：Atiprimod体内外分别作用于四种MCL细胞系SP53，M1NO，Grant 519、Jeko-1和从MCL患者组织、骨髓或外周血中分离出的新鲜肿瘤细胞，以及来源于5例正常人外周血的单个核细胞(PBMCs)。 结果：Atiprimod不仅能有效抑制四种MCL细胞系SP53，MINO，Grant 519，Jeko-1和来源于MCL患者的新鲜肿瘤细胞的增殖以及促进其凋亡，还可以显著抑制MCL-免疫缺陷(SCID)鼠动物模型体内瘤细胞的生长并明显延长其生存期。同时，Atiprimod还可抑制经PHA、PMA/ionomycin-、抗CD3和抗CD28单克隆抗体活化的正常人PBMC细胞增殖。重要的是Atiprimod对正常淋巴细胞显示为低毒性。Western免疫印记结果表明Atiprimod是通过激活c-Jun NH(2)-末端蛋白激酶(JNK)途径，抑制信使核糖核酸转录活化子(STAT3)和IкB活性。 二、评价万珂(bortezomib，BTZ)与美罗华(rituximab，RTX)和环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)联合治疗复发和转移的套细胞淋巴瘤(MCL)是否具有叠加或协同效应。 方法：分别用BTZ、RTX、CTX或三药联合组成的BRC方案作用于4种MCL细胞系：SP53，MINO，Grant 519和Jeko-1以及从3例复发和转移的MCL患者组织、骨髓或外周血中分离出的新鲜肿瘤细胞，通过分析细胞增殖和凋亡情况，判断BRC方案抗MCL细胞的叠加或协同效应。用Western blot方法探讨BTZ、RTX、CTX和BRC诱导MCL细胞凋亡的机制。建立MCL-严重免疫缺陷(MCL-SCID)鼠动物模型，用以评价BRC方案与其他对照治疗组体内治疗MCL效果。 结果：单药BTZ和CTX在体外可以有效抑制MCL细胞生长(P<0.01)，且具有剂量依赖性。BTZ和CTX的IC<,50>值(50％生长抑制率)分别是10-20 nM和5-20 mM之间。当固定RTX(10 μg/mL)和CTX(10 mM)浓度，而不断增加BTZ药物浓度，可以显著性地抑制MCL细胞生长(P<0.01)。BRC方案对MCL细胞系和来源于患者的新鲜肿瘤细胞的凋亡诱导率分别为69.7％和92.6％(P<0.05 and P<0.01，与单药BTZ，RTX和CTX相比)。而且，BRC方案比单药提早活化caspases-8，-9，-3，和PARP凋广信号。Caspases广谱抑制剂Z-VAD可以完全阻断由BRC诱导的MCL细胞凋亡。MCL-SCID鼠体内实验表明，BRC方案可以彻底消除MCL肿瘤包块并延长70％受试鼠长期无病生存期至10周(动物实验截止)，而单药治疗组和PBS对照组的荷瘤鼠存活期却少于5周。 结论：细胞毒类化疗药物联合BTZ和抗CD20单抗体内外可以有效的抑制MCL细胞增殖和诱导其凋亡。BRC可作为治疗复发和转移MCL的一个新的临床治疗方案。本研究结果为BRC方案治疗复发和转移MCL的临床前试验提供了理论依据。 三、调MCL细胞表达Bax，Bad，和磷酸化Bcl-2水平。最终导致凋亡诱导因子(AIF)、线粒体细胞色素C的释放以及Caspase-9，-3和PARP的激活。经AIF抑制因子预处理后的MCL细胞能完全阻断凋亡的发生，而广谱的Caspase抑制因子则不能完全阻断MCL细胞凋亡。 结论：Atiprimod体内、外可有效抑制MCL增殖和诱导其凋亡，并且，主要是通过激活AIF信号传导途径诱导肿瘤细胞凋亡。本研究结果表明Atiprimod是一种很有前景的治疗MCL的靶向药物。