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摘要本文在小试研究的基础上，对杜仲叶中生物活性物质的提取分离工艺进行了中间试验研究，并根据中试特点，对工艺条件进行了改进，确定了提取分离生物活性物质的中间试验工艺流程。研究结果如下： 提取分离杜仲叶中有效成分的工艺流程为：60％乙醇→回流提取(80℃；2h/次；料液比1：16，提取3次)→制备浸膏(浓缩，50℃真空干燥)→加水转溶(4次)→定容(浓度为0.46g/mL，调pH值2～3)→上XDA-6树脂柱→纯净水洗脱得到糖和京尼平苷酸→15％乙醇洗脱得到绿原酸(浓缩析出粗品→重结晶得到纯品)→60％乙醇洗脱得到黄酮→树脂的再生(多量醇少量酸碱法)。具体的操作要点如下： 1.提取：在中试规模提取时采用加热回流的提取方式。将6kg杜仲叶放入50L反应器中，以料液比1：16加入60％乙醇在80℃行回流提取，提取时间为2h，提取次数为3次。合并提取液，过滤，浓缩干燥至浸膏状。所得的杜仲叶浸膏得率为39.78％，其中总糖含量为32.62％，京尼平苷酸含量为1.57％，绿原酸含量为6.42％，黄酮含量为6.82％。 2.上柱：将浸膏用水转溶，过滤，浓缩至一定浓度定容(浓度确定为固形物质量为0.46g/mL)，将其pH值调至2～3后上XDA-6树脂柱，所用树脂柱规格为Ф200×1500mm的层析柱，柱体积为29L。静态吸附8h后洗脱。 3.洗脱：先用纯净水洗脱树脂柱，将水洗脱液分段收集，第1，2柱体积经浓缩干燥得总糖粗品，第3至第20柱体积洗脱液经浓缩后得京尼平苷酸粗品；再用15％乙醇洗脱绿原酸，将第1、2柱体积与后面8个柱体积的洗脱液分开收集浓缩得两部分绿原酸；之后用50％～70％乙醇洗脱总黄酮。经过XDA-6树脂分离后得到的总糖含量为50.35％，其固形物得率22.48％；京尼平苷酸含量为22.74％，其固形物得率为1.23％；绿原酸含量为32.06％，其固形物得率为3.97％；黄酮含量为29.89％，其固形物得率为4.44％。 4.将再生后的XDA-6树脂按照上述的工艺方法，重复前面的步骤，取得再生树脂分离得到的杜仲叶中各有效成分的含量。再生树脂和新树脂分离得到的总糖、京尼平苷酸含量差别不大；而绿原酸含量则高于新树脂，最高可达46.35％，比新树脂高14.29％。由此可以看出XDA-6树脂再生4次后，仍然可以进行有效成分的分离纯化，能够达到反复利用，降低成本的目的。 通过本中试研究证明此工艺是可行的，并且省去萃取这一步，使工艺路线更加简单。 整个中试过程的物料消耗量为：提取分离6kg杜仲叶，需用．XDA-6树脂20kg。用新树脂分离时，整个工艺过程消耗纯净水540L，95％工业乙醇80L，浓盐酸5L，氢氧化钠3600g；用再生树脂分离时，消耗纯净水330L，95％工业乙醇90L，浓盐酸5L，氢氧化钠3600g。 根据中试研究结果，认为利用本工艺进行工业化规模生产是可行的，所需的生产设备简单，易实现，生产周期短。