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摘要目的： 1.观察树突状细胞(Dendritic eell，DC)在人正常子宫内膜与子宫内膜癌组织形态结构的特征；2.研究DC在人正常子宫内膜与子宫内膜癌组织中抗原提呈功能的变化及发生凋亡的相关调控机制；3.探讨子宫内膜癌组织DC浸润状况与癌组织病理分级和临床分期关系。 方法： 绝经期妇女正常子宫内膜组织20例及子宫内膜样腺癌组织35例。 1.采用常规HE染色和S-100抗体标记DC免疫组织化学染色，光镜观察其形态特点；并采用透射电镜技术观察组织DC超微结构特征。 2．采用流式细胞技术检测DC表面CD 80、CD86以及双重免疫组织化学染色结合图像分析方法检测：DC表面HLA、CD40、CD54分子在人正常子宫内膜、子宫内膜癌组织的表达强度。 3．采用TUNEL与免疫双重染色相结合方法，计算DC凋亡发生率；通过免疫双重染色与图像分析方法，检测与DC凋亡相关的CD40、Fas/FasL(CD-95/CD-95L，)、Bc1-2在人正常子宫内膜与子宫内膜癌组织DC上的表达强度。 4.取人子宫内膜癌组织35例(病理分级：高分化腺癌14例、中分化腺癌12例、低分化腺癌9例；临床分期：Ⅰ期14例、Ⅱ期13例、Ⅲ～Ⅳ期8例)。采用S-100单克隆抗体标记DC，利用体视学方法检测不同病理分级、不同临床分期的子宫内膜癌组织DC的数密度参数。 结果： 1．正常子宫内膜组织DC光镜及电镜超微结构： 光镜下观察HE染色和免疫组化染色发现，在正常子宫内膜组织，DC常单个或多个稀疏散在分布于腺体问、血管间、腺上皮细胞间和血管内皮细胞；细胞形态不规则，呈圆形、卵圆形、哑铃形或多角形。胞体较大，细胞膜表面树突状突起依稀可见。胞核大深染呈蓝黑色颗粒，形状不规则。 正常子宫内膜组织DC超微结构特征如下：细胞形态不规则，胞膜表面有较多树突状胞浆突起，突起粗细不等，多呈大而细长形，也有部分突起呈短小圆形；胞饮小泡多见且含有微量絮状电子致密物；胞质中线粒体丰富呈卵圆状，较多分布于胞饮小泡周围；粗面内质网、．高尔基体数量少见，溶酶体罕见；胞核较大多呈圆形或卵圆形，居于胞浆中央，核内常染色质较多，异染色质量多且高度凝聚于核膜下。细胞间缝隙连接可见。 2．子宫内膜癌组织DC光镜及电镜超微结构： 光镜下观察HE染色和免疫组化染色发现：与正常子宫内膜组织DC相比，大多数DC形态较规则呈圆形，但也可见到卵圆形、哑铃形或多角形DC；胞体显著变小，细胞膜表面树突状突起难以见到，但胞核显著减小。 子宫内膜癌组织DC超微结构特征如下：细胞形态不规则，与正常子宫内膜组织DC相比，胞膜较光滑，胞膜表面树突状胞浆突起显著减少，部分突起呈粗短状；胞质中线粒体相对少，圆形而电子密度高的初级溶酶体和不规则形且电子密度高低不一的次级溶酶体多见；高尔基体、粗面内质网、核糖体午富；含微量絮状电子致密物的胞饮小泡显著减少；胞质中可见形态特殊的颗粒，该颗粒外周膜包裹，略呈圆形，中间部位稍弯曲，如耳机状，颗粒中由高电子致密物居于一侧，而另一侧则呈透亮状；胞核显著减小，居于胞质一侧，常呈肾形或马蹄形，核内常染色质较少，异染色质多边集于核膜下。 3．DC膜表面分子CD80、CD86的表达通过流式细胞仪检测人正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织DC膜表面分子CD80、CD86的表达，结果显示，子宫内膜癌组织DC膜表面分子CD80、CD86的表达低于人正常子宫内膜，且具有统计学显著差异。(P<0.05)4．正常子宫内膜和子宫内膜癌组织DC表面HLA-DR、CD40、CD54的表达： 人正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织DC膜表面分子行双重免疫组化染色，结果经图像分析定量处理，正常子宫内膜组织DC膜表面HLA-DR、CD40、CD54表达强度高于子宫内膜癌组织，且均具有统计学显著差异(P<0.05)。 5．人子宫内膜组织DC的凋亡利用末端标记(TUNEL)和S-100单克隆抗体对人正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织DC双重免疫组化染色，结果显示DC凋亡发生率分别为6．82±O．53％、15.92±0.87％，统计分析表明在人正常子宫内膜组和子宫内膜癌组中TUNEL阳性DC发生率有统计学显著差异(P<0.05)，子宫内膜癌组DC TUNEL阳性率高于人正常子宫内膜组。 6．正常子宫内膜和子宫内膜癌组织DC表面CD40、Fas/FasL(CD-95/CD-95L)、Bc1-2的表达： 人正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织DC凋亡相关分子双重免疫组化染色，结果图像分析定量处理，DC膜表面的CD40表达强度，在正常子宫内膜组织高于子宫内膜癌组织，且具有统计学显著差异(P<0.05)；Fas(CD95)在正常子宫内膜组织中DC膜上的表达强度高于子宫内膜癌组织中的表达，且具有统计学显著差异(P<0.05)，而FasL(CD95L)表达强度则恰恰相反；DC膜表面的Bc1-2表达强度，在正常子宫内膜组织高于子宫内膜癌组织，且具有统计学显著差异(P<0.05)。 7．人子宫内膜癌组织DC与病理分级、临床分期关系结果经图像分析定量处理，子宫内膜癌组织在高分化、中分化、低分化三组中，DC数密度在统计学上有显著差异(P<0.05)；在临床分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期中，DC数密度在统计学上有显著差异(P<0.05)。结论： 1．子宫内膜癌组织DC形态结构不同于正常子宫内膜组织，结构上的差异反映了DC对抗原的摄取、加工、提呈等功能的改变。 2．子宫内膜癌组织DC表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40、CD54等分子的表达均显著低于正常子宫内膜组织，说明子宫内膜癌组织DC抗原提呈功能降低，含肿瘤抗原的DC与T细胞间相互粘附减弱，使机体T细胞免疫应答难以有效发生，最终发生肿瘤逃逸击。 3．子宫内膜癌组织DC凋亡率显著高于正常子宫内膜组织；与凋亡相关的CD40、Bc1-2等分子在子宫内膜癌组织DC上的表达均低于正常子宫内膜组织，促进了子宫内膜癌组织DC的凋亡，有利于子宫内膜癌的发生和发展；但子宫内膜癌组织DC的Fas(CD95)低表达FasL(CD95L)高表达状态，进一步说明子宫内膜癌组织DC的凋亡存在复杂的调控机制。 4．在子宫内膜癌组织中，组织分化愈高、临床分期越早的患者，DC在组织中浸润的数目则越多，患者的预后可能愈好；反之，患者的预后则较差。