血管内皮抑制因子thrombospondin-1对淋巴管内皮细胞生成的影响-论文-万方医学网

血管内皮抑制因子thrombospondin-1对淋巴管内皮细胞生成的影响

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摘要目的：探讨血小板反应素-1(thrombospondin-1，TSP-1)对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响及作用机制，旨在找到安全、有效、实用的淋巴管生成抑制剂。材料和方法：实验所用的淋巴管内皮细胞取自健康猪的胸导管。1 淋巴管内皮细胞的分离、培养及传代。2 细胞鉴定实验：本实验采用免疫细胞化学的方法，应用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光法和淋巴管内皮细胞特异性抗体血管内皮生长因子受体3 (vascular endothelial growth factorreceptor-3，VEGFR-3)对培养的细胞进行联合鉴定。3抑制实验：本实验采用划线法和MTT 法观察血小板反应素-1 对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响。(1)划线法：包括对照组和3种浓度的实验组。(2)MTT法：包括对照组和5种浓度的实验组。结果：1、淋巴管内皮细胞的鉴定：经第Ⅷ因子和VEGFR-3 对培养的细胞联合鉴定，为典型淋巴管内皮细胞。2、光镜观察：光镜下淋巴管内皮细胞呈特征性“鹅卵石状”或“铺路石状"镶嵌排列。3、划线法：与对照组相比，当TSP-1 的浓度达到1.0ug/ml时，对淋巴管内皮细胞的增殖和游走都有明显的抑制作用(P<0.01)。4、MTT法：当 TSP-1 的浓度达到0.8ug/ml时，两者对内皮细胞的增殖具有显著的抑制作用(P<0.01)。结论：1、使用本实验方法培养的细胞为典型的淋巴管内皮细胞，而且能稳定地保持其生物学特征。2、Ⅷ因子和VEGFR-3 联合鉴定法是鉴定淋巴管内皮细胞的一种可靠且特异的方法。3、血小板反应素-1 对淋巴管内皮细胞的增殖和游走具有明显的抑制作用，且具有剂量依赖性。