高静压对枯草芽孢杆菌芽孢的灭活作用的研究-论文-万方医学网

高静压对枯草芽孢杆菌芽孢的灭活作用的研究

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摘要本文以枯草芽孢杆菌ATCC6633为对象，采用高静压协同中温的方法，实验初步探讨了高静压对此菌种芽孢的萌发和灭活机制，比较研究了不同施压方式对芽孢的致死效应，为科学、高效利用高静压杀菌技术提供依据。主要研究内容和结果如下：采用45℃，低压200MPa处理40min，芽孢萌发率可达76.42％，而单纯在45℃水浴中处理，萌发率不到50％。通过荧光分光光度计，检测到低压200 MPa处理10～40min后，(Tb-DPA)<'+>的相对荧光强度呈增大趋势。实验结果说明低压能够诱导芽孢萌发，使得大量DPA(吡啶二羧酸)从胞内释放出来。因此将DPA作为芽孢萌发的指示剂。当向芽孢菌悬液中添加25mmol/L DPA后，萌发率显著提高至96.47％。DPA在芽孢萌发过程中起到重要的作用，外源添加DPA可以促进芽孢的萌发效果。同时也进一步提示了芽孢萌发的过程是先释放DPA，然后DPA激活了芽孢萌发有关的酶活，进而开始一系列营养代谢活动。另外，研究了连续式和间歇式两种不同施压方式对枯草杆菌芽孢的灭活作用。实验设计了分阶段施压方式，即先低压200 MPa/5 min，再高压500 MPa/5 min，循环1～3次。结果表明，同200 MPa～500MPa连续施压30 min相比，间歇施压更有效地杀灭芽孢，循环一次即可达到83.9％的致死率，并缩短了处理时间。经扫描电镜观察，芽孢外壳出现凹陷、皱褶等形态变化，间歇法反复的升压、卸压产生强烈的机械剪切力，造成芽孢损伤，及内容物的泄漏，甚至死亡。