摘要实验目的 双歧杆菌是人和动物肠道内重要的生理菌,其表面分子脂磷壁酸(LTA)在体内、外均能诱导肿瘤细胞凋亡和分化,但双歧杆菌LTA与大肠癌侵袭转移方面的关系的报道却很少。本实验通过研究经双歧杆菌LTA处理后,大肠癌细胞株LoVo和HT-29的粘附、侵袭、转移能力的变化以及其与肿瘤转移相关指标VEGF、CD44v6和MMP-2表达变化,初步探讨双歧杆菌脂磷壁酸对大肠癌转移的抑制作用及其机制。 实验方法 1.采用噻唑兰比色(MTT)法检测经双歧杆菌LTA处理前后大肠癌细胞株LoVo和HT-29对人工基底膜(Matrigel)的粘附能力变化;Transwell小室体外侵袭迁移实验检测经双歧杆菌LTA处理前后两株细胞侵袭、迁移能力的改变。 2.LTA体外作用大肠癌细胞株LoVo和HT-29后,用RT-PCR检测肿瘤转移相关指标VEGF、CD44v6和MMP-2的mRNA水平变化,Western blot分析VEGF蛋白水平的变化;免疫细胞化学分析CD44v6和MMP-2蛋白水平的变化。 实验结果 1.经双歧杆菌LTA处理后,LoVo细胞和HT-29细胞对人工基底膜(Matrigel)的粘附能力降低,侵袭、迁移能力明显下降。 2.经双歧杆菌LTA处理后,LoVo细胞和HT-29细胞中与肿瘤转移相关的VEGF、CD44v6和MMP-2的mRNA及蛋白表达水平均下降。 实验结论 1.双歧杆菌LTA能明显抑制LoVo细胞和HT-29细胞的粘附、侵袭及迁移能力。 2.双歧杆菌LTA能明显下调LoVo细胞和HT-29细胞中VEGF、CD44v6和MMP-2的mRNA和蛋白质的表达。
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