摘要目的:观察人参皂甙Rbl药理预适应在细胞肥厚条件下对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用并对其作用机制进行探讨。为人参皂甙Rb<,1>的临床开发和应用提供试验依据。 方法:采用纯化培养的原代心肌细胞,用药物直接诱导产生的心肌肥厚模型进行缺氧(缺血)、复氧(再灌注)以及缺氧预处理以观察人参皂甙Rbx的保护作用。 使用Ang Ⅱ刺激乳鼠心肌细胞肥厚,以0.01~10 μmol·L<'-1> Rb<,1>对H/R.损伤心肌细胞预适应给药48 h。 用激光共聚焦显微镜LSM510软件扫描检测心肌细胞表面积(CSA)。使用南京建成生物工程公司考马斯亮蓝蛋白检测试剂盒测定细胞蛋白(TP)。乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、一氧化氮酶(NOS)、丙二醛(MDA)的含量按试剂盒说明进行。用四唑盐(MTT)比色法检测细胞生存率。使用流式细胞仪以PI染色法分析细胞凋亡情况。 结果:与:H/R组相比,Rb<,1>组心肌细胞表面积(CSA)降低可达41.56%(P<0.01),蛋白含量增加43.37%(P<0.01);乳酸脱氢酶(LDH)含量降低59.20%(P<0.01);一氧化氮(NO)活性增加2.67倍(P<0.01);一氧化氮合酶(NOS)活性提高达2.44倍(P<0.01);丙二醛(MDA)含量降低72.03%(P<0.01);细胞生存率增加2.28倍(P<0.01);凋亡率降低85.29%(P<0.01)。 结论:人参皂甙Rb<,1>预适应对AngⅡ致肥厚乳鼠心肌细胞缺氧复氧(H/R)具有保护作用,可显著减轻肥厚心肌细胞的损伤,其保护机制与抑制细胞凋亡、减少脂质过氧化和乳酸脱氢酶(LDH)释放、增强一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的活性有关。
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