检索历史 清除

摘要目的： 在实验室条件下观察温度、pH和培养时间对黄绿青霉菌(PCV)产毒的影响，以及温度、pH对黄绿青霉菌产毒的交互作用。 方法： 用察氏培养基培养黄绿青霉菌。黄绿青霉菌菌株购自中科院微生物研究所。用实验法观察单一因素如温度、pH和培养时间对产毒量的影响，采用析因设计的方法观察温度、pH 对产毒的交互作用。温度分为低温(8℃)恒温、高温 (30℃) 恒温以及8～30℃变温三种情况，变温培养方法为白天30℃，夜间8℃。pH则是通过添加NaOH 和 HCl 溶液将培养基控制在pH为5.0、7.0和9.0。二氯甲烷提取样品中的黄绿青霉毒素(CIT)。用高效液相色谱法检测毒素含量。高效液相色谱柱为SiO<,2> (4.6mm×150mm，5μm)；流动相为乙酸乙酯：正己烷(7∶3，V/V)；流速为1ml/min；检测波长为383nm；分析时间10min。 结果： 1.单一因素对黄绿青霉菌产毒的影响 (1) 黄绿青霉菌在高温(30℃)恒温条件下的产毒量为 231.02±9.33 μg/g 培养基；在低温(8℃)恒温条件下的产毒量为222.36±23.66μg/g 培养基；在变温(8～30℃) 条件下的产毒量为 532.16±14.90μg/g 培养基；在变温条件下的产毒量明显高于高温和低温条件的产毒量(P<0.05)，高温(30℃)恒温条件下产毒量与低温(8℃)恒温无统计学差异(P>0.05)。 (2)黄绿青霉菌在中性(pH=7.0)条件下的产毒量为231.02±9.33μg/g 培养基；在酸性(pH=5.0)条件下的产毒量为161.86±40.89μg/g培养基；在碱性(pH9.0)条件下的产毒量为202.00±50.59μg/g培养基；中性和碱性条件下产毒量无统计学差异(P>0.05)，且均高于酸性条件下的产毒量(P<0.05)。 (3)黄绿青霉菌培养5d的产毒量为87.06±6.32μg/g培养基；培养10d的产毒量为309.90±42.47μg/g 培养基；培养15d的产毒量为236.38±34.78μg/g培养基；培养20d的产毒量为153.94±38.80μg/g培养基；结果显示，CIT产量随培养时间的延长而增加，在培养10d时达到最高(P<0.05)，其后随时间延长，产毒量反而下降。 2.温度和pH对黄绿青霉菌产毒的交互作用 黄绿青霉菌在高温、酸性条件下的产毒量为92.14±16.00μg/g培养基；在高温、碱性条件下的产毒量为 234.76±70.79μg/g培养基；在低温、酸性条件下的产毒量为 101.70±5.57μg/g培养基；在低温、碱性条件下的产毒量为91.02±26.70μg/g培养基；经分析，温度和pH对黄绿青霉菌产毒的影响存在交互作用(P<0.05)。 结论： 1.温度、pH和生长时间对黄绿青霉菌产毒有较大影响，尤其在变温条件下、中性的环境中产毒量较高，培养 10d是黄绿青霉菌产毒量达到峰值。 2.温度和pH对黄绿青霉菌的产毒有交互作用，在变温、偏碱性的条件下，可促进CIT生成。 3.克山病高发区的环境温度有利于黄绿青霉菌的生长和产毒。