检索历史 清除

摘要广泛来源于各种工业生产过程中的苯酚对环境造成严重污染，极度危害人类健康。因此，必须有效处理含酚废水。利用微生物降解苯酚效果较好，但一般的苯酚降解菌降解苯酚能力有限。本研究的目的在于：通过对苯酚降解菌株的选育及细胞固定化，进一步提高其降解苯酚能力并有利于回收再利用，使其更适宜于工业化生产。 本研究采用双亲灭活原生质体融合技术选育出一株高效苯酚降解菌株，定名为Pseudomonas stutzri JFL 2008，比出发菌株降解苯酚能力提高20％，能降解苯酚的最高浓度为1800mg·L-1。 以海藻酸钠为载体，将高效苯酚降解菌进行了固定化，并且利用正交实验确定了其固定化的最佳条件为4％的海藻酸钠，4％的CaCl2，包埋0.4g的湿菌体以及2h钙化时间。固定化细胞能降解苯酚的最高浓度为2200 mg·L-1,比游离菌体的降酚能力约提高22％。考察了温度和pH对固定化细胞性能的影响，结果显示：苯酚降解菌Pseudomonas smtzri JFI 2008的最佳作用温度为30℃，最理想pH条件为5-9。 采用PCR技术将高效苯酚降解菌Pseudomonas sp．JFL 2008的16SrDNA基因序列进行克隆，并与Genebank中已报道的16SrDNA基因序列进行比对，结果发现与多株假单胞菌属的菌株具有高度的同源性(高达99％)，从分子角度证明菌株Pseudomonas sp．JFL2008属于假单胞菌属。 采用PCR技术将高效苯酚降解菌Pseudomonas sp．JFL 2008的苯酚羟化酶基因序列进行克隆，并与Genebank中已报道的序列进行比对，软件分析结果表明，菌株Pseudomonas sp．JFL 2008的苯酚羟化酶基因序列与已发表的Pseudomonas sp．D28864.1苯酚羟化酶基因的相关序列有98.77％的同源性，二者推导的氨基酸序列同源性达100％，由此从基因水平上证实了菌株Pseudomonas sp．JFL 2008的苯酚降解功能的遗传学基础。