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摘要β2肾上腺素受体(β2-AR)激动剂用于哮喘的对症治疗已有60多年的历史。SPFF[2-(4-amino-3-chloro-5-trifluomethyl-phenyl)-2-tert-butylamino-ethanol hydro -chloride]是沈阳药科大学制药工程学院合成开发的新型β2肾上腺素受体激动剂，前期研究工作己证实它具有强大的支气管扩张作用和相对较高的β2-AR选择性，同时还具有作用时间较长等特点，目前己处于II期临床试验阶段。SPFF的结构中含有一个手性碳原子，因而存在一对对映异构体。由于具有不同立体构象的对映异构体在生物活性、毒性、药物代谢动力学等方面常有很大差异，因此，我们比较研究了SPFF的对映异构体((-)-SPFF和(+)-SPFF)的抗哮喘的作用特点，并初步探讨了它们的作用机制。 首先用离体实验考察了(±)-SPFF及其对映异构体对豚鼠气管平滑肌的扩张作用。结果显示，(±)-SPFF及其对映异构体都能够浓度依赖性的松弛静息张力和被气管致痉剂(组胺和乙酰胆碱)收缩的豚鼠气管条，(-)-SPFF的作用强度强于(±)-SPFF和(+)-SPFF。但是，单一对映体和(+)-SPFF松弛离体豚鼠气管平滑肌的最大效应彼此接近，表明三者的内在活性是相似的。同时我们通过对选择性β2受体阻断剂ICI-118551拮抗(±)-SPFF、(-)-SPFF和(+)-SPFF作用的分析，还证实了SPFF的单一对映体扩张离体气管平滑肌的作用都是通过β2受体介导的。离体豚鼠肺支气管灌流实验结果显示了(-)-SPFF在扩张整个气道作用中的显著优势，(-)-SPFF与(+)-SPFF的作用强度差别为23.2倍。此外，(+)-SPFF对(-)-SPFF的影响实验结果显示，(+)-SPFF与豚鼠气管条孵育20分钟对(-)-SPFF松弛静息张力气管条的量效曲线几乎没有影响。 其次，通过整体动物的不同模型，考察了(±)-SPFF及其对映异构体扩张在体气管平滑肌的作用。结果显示，灌胃给药时，(-)-SPFF(0.0625,0.25 and 1 mg.kg-1)对组胺和乙酰胆碱混合喷雾引起豚鼠窒息的保护作用与同剂量(±)-SPFF。的作用相似；经十二指肠内给药时，(-)-SPFF对组胺诱导麻醉豚鼠肺溢流量增加的抑制作用分别强于(±)-SPFF和(+)-SPFF1.6倍和6.3倍；在肺机械功能实验中，单一对映体(-)-SPFF和(+)-SPFF与(±)-SPFF对肺顺应性的降低具有同等作用强度的抑制作用，(-)-SPFF抑制肺阻力升高作用强于(+)-SPFF约3.5倍。 此外，SPFF、(-)-SPFF和(+)-SPFF(0.01、0.1和1 μM)对致敏大鼠肺组织接触过敏原时释放组胺具有相似的抑制作用，在不影响小鼠气道粘液分泌的情况下，(-)-SPFF(0.04、0.10mg．kg-1)和(±)-SPFF(0.10、0.25 mg．kg-1)明显促进家鸽气道纤毛的转运功能，而(+)-SPFF(0.04、0.10和0.25 mg．kg-1)对家鸽气道纤毛的转运没有促进作用。静脉注射和口服(-)-SPFF对小鼠的LD50(95％confidence limits)分别为55.7(51.6～58.8)和468.3(393.0～543.6)mg．kg-1，而静脉注射和口服(+)-SPFF对小鼠的LD50分别为36.2(33.4～38.2)和297.5(257.5～343.7)mg．kg-1，提示(-)-SPFF的毒性低于(+)-SPFF。 此外，我们从激动剂在细胞外与受体的结合特征及在细胞内产生的效应([Ca2+]i)两方面初步探讨了(+)-SPFF及其对映异构体的作用机制。分别以豚鼠肺和心房组织作为β2-AR和β1-AR的来源，以碘标左旋吲哚洛尔((-)[125I]pindolol，IPIN)作为标记性配基的放射配基结合实验结果显示，(-)-SPFF对β2-AR的亲和力分别高于(+)-SPFF 6倍和(+)-SPFF 164倍，这可能是(-)-SPFF扩张气道作用强度较高的原因之一。(-)-SPFF、(±)-SPFF和(+)-SPFF的选择指数(Ki(atri)/K1(lung)分别为24.72、7.43和2.31，提示(-)-SPFF对β2-AR(含80％β2-AR的肺组织)的选择性高于(+)-SPFF，有利于减少其心血管方面的副作用。通过原代培养豚鼠气管平滑肌细胞，用Fura-2/AM作为Ca2+探针考察了(-)-SPFF、(+)-SPFF和(±)-SPFF对[Ca2+]i影响。 结果显示，较低浓度的(-)-SPFF(6×10-10 mol·L-1)对[Ca2+]1的降低作用较同浓度(+)-SPFF的作用显著，而较高浓度的(-)-SPFF(6×10-8，6×10-6mol·L-1)与同浓度的(±)-SPFF和(+)-SPFF相比，降低[Ca2+]i作用差异不显著。 综上所述，我们的实验结果表明(-)-SPFF作为(±)SPFF的优映体，与其劣映体(+)-SPFF比较，具有作用强度高、对β2-AR亲和力强、选择性高等优点。对(-)-SPFF开发的成功，将为临床治疗哮喘提供一种低毒、高效的单一对映体支气管扩张药。