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摘要临床经验和药理实验表明，一个方剂的主治病证常涉及到现代多种疾病，方剂的功效与其配伍有关，中医方剂功效内涵涉及到现代药理的多方面作用。 本课题以小柴胡汤降血脂作用为切入，运用高脂血症性脂肪肝大鼠模型，在确认小柴胡汤具有降脂作用的基础上，通过拆方，探察该方中的主要功能药群与全方降脂作用的关系，以认识特定药理作用下该方中的药群配伍关系，为拓展小柴胡汤的临床运用范围和发现具有降脂保肝作用的中药配伍药群提供一定的药理学基础。 论文分为文献综述活动实验研究两部分。文献综述对小柴胡汤临床与实验研究现状和高脂血症性脂肪肝的动物模型的研究进展进行了综述。实验研究观察了小柴胡汤对高脂血症性脂肪肝模型大鼠的防治作用和比较小柴胡汤方中不同组群配伍对高脂血症性脂肪肝防治疗效用。 研究一：小柴胡汤对高脂血症性脂肪肝大鼠的作用观察方法：体重为190-210g SD雄性大鼠90只，随机分成五组，正常对照组和模型组各30只，小柴胡汤高剂量组(18.9mg/kg)和低剂量组(9.45mg/kg)及辛伐他汀组(4.67mg/kg)每组各10只。除正常对照组给以等量生理盐水灌胃外，其余各组大鼠每天上午给予脂肪乳剂(10ml/kg)灌胃，每天1次，连续3周。从第2周开始，正常对照组，模型组，每天下午给予生理盐水(10ml/kg)灌胃，小柴胡汤高、低剂量组、辛伐他汀组大鼠每天下午给予相应剂量药物灌胃，每天1次，连续2周。从第3周开始，停止灌胃，喂普通饲料，观察模型的恢复情况，连续观察2周。 实验第1周和第2周时分别从正常对照组和造模组各随机抽取10只大鼠，禁食12小时后，乙醚麻醉，从眼眦取血，离心，取血清，冷冻密封保存，检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C浓度。 实验第3周从正常对照组，模型组中各随机抽取10只大鼠，小柴胡汤高、低剂量组，辛伐他汀组，10％水合氯醛腹腔麻醉，主动脉取血5ml，离心，取血清，冷冻密封保存，以备检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C。实验结束时处死动物后称量体重、肝脏湿重，计算肝指数(肝指数＝肝湿重/体重×100％)。实验第4周从正常对照组，模型组中各随机抽取10只大鼠，取材同上。实验第5周，取材同上。 结果：第1周时，与正常对照组比较，模型组大鼠的血清TC，TG，LDL-C，均明显升高(P<0.05)；实验第2周至第3周时的血清TC，TG，LDL-C，HDL-C均持续升高，第3周的肝脏指数均明显升高(P<0.05)，肝脏体积明显增大，边缘圆钝，包膜紧张，外观呈土黄色，与周围组织粘连，切面油腻感明显：镜下肝组织呈重度脂肪变。第4周时的血清TC，TG，LDL-C，HDL-C仅显升高趋势，大鼠肝脏指数升高(P<0.05)；实验第5周时的肝脏指数和血清TC，TG，LDL-C，HDL-C均无明显差异。 第2周时，与模型组比较，小柴胡低剂量组和小柴胡高剂量组大鼠血清TG均见降低(P<0.05)，辛伐他汀组大鼠血清TG、LDL-C、TC明显降低(P<0.05)；与小柴胡汤高、低剂量组相比，辛伐他汀降脂大鼠血清TG明显降低(P<0.05)。第3周时，与模型组比较，小柴胡汤低剂量组、小柴胡汤高剂量组和辛伐他汀组大鼠肝脏指数，肝TG和TC，血清TG、LDL-C、TC均见不同程度地降低(P<0.05)，肝组织脂肪变均见明显减轻；与小柴胡汤低剂量组相比，辛伐他汀组大鼠血清TG、LDL-C、TC明显降低(P<0.05)；小柴胡汤低剂量组和高剂量组间无显著性差异。结果表明：大鼠脂肪乳剂灌胃1周后即可出现高脂血症，连续3周可引起持续的高脂血症，并伴有肝脏脂肪变；停止造模1周后血脂明显下降，2周后血脂和肝脂均可恢复至正常。小柴胡汤高、低不同剂量均有不同程度的降血脂作用，连续给药2周降血脂作用明显，高剂量组并有降肝脂作用。小柴胡汤降血TG的作用较快，对HDL-C无明显影响。 研究二：小柴胡汤及其不同组群配伍对高脂血症性脂肪肝的作用方法：依据小柴胡汤方中的功能药群，将该方分为柴胡-黄芩(A)组、半夏-生姜(B)组、人参-甘草-大枣组(C)共三组，运用正交表L8(27)，A，B，C三因素有8种组合即A、B、C、A＋B、A＋C、B＋C、A＋B＋C、空白。大鼠45只，随机分为9组：正常对照组、模型组、A组(7.7g/kg)、B组(4.2g/kg)、C组(7g/kg)、A＋B组(11.9g/kg)、A＋C组(14.7g/kg)、B＋C组(11.2g/kg)、A＋B＋C组(18.9g/kg)，每组5只。 实验第1周开始，模型组和各给药组大鼠每天上午给予脂肪乳剂(10ml/kg)灌胃，正常组给予等量生理盐水灌胃，连续3周。实验第2周开始，各给药组大鼠于每天下午分别给予相应剂量的药物灌胃，模型组和正常对照组每天下午分别给予等量生理盐水灌胃，连续2周。于实验第3周未，各组大鼠10％水合氯醛腹腔麻醉，主动脉取血5ml，离心，取血清，冷冻密封保存，备测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C；剖取肝脏，称重，计算肝脏指数；取肝组织0.3g，匀浆，测肝脂质TC、TG、LDL-C、HDL-C；另取小块肝组织，置于10％的甲醛溶液中固定，切片，HE染色，显微镜下观察。 结果：小柴胡汤中三组功能药群及其配伍均有不同程度地降低血脂、肝脂和肝脏指数以及改善肝组织病变的作用。各配伍组均能降低模型大鼠血脂TG的升高，各因素间有显著性交互作用；均能降低模型大鼠血清TC和LDL，其中B、C有显著性作用，各因素间无显著性交互作用；对模型大鼠血脂HDL无显著性作用。各配伍组均能降低模型大鼠肝脂TG的升高，其中A、B、C因素有显著性作用，A、B因素间有显著性交互作用；均能降低模型大鼠肝脂TC的升高，其中A，B因素有显著性作用；各因素均能降低模型大鼠肝脏指数，其中A，B，C因素有显著性作用；A＋B组、A＋C组、B＋C组、A＋B＋C组大鼠肝细胞脂肪变均明显减轻。A＋B＋C组显著降低模型大鼠的血清TG、TC、LDL-C，肝脏TC与TG及肝脏指数，其作用范围和效用强度均优于其他各因素及其配伍。 结果表明：小柴胡汤及其药群配伍均能不同程度地降低模型大鼠血清TG、TC、LDL-C的水平和肝脏TG、TC的含量及肝脏指数，具有一定的调节血脂、减轻肝脏脂肪沉积的作用；小柴胡汤全方在降低模型大鼠血清TG、TC、LDL-C，降低其肝脏TC、TG及肝脏指数等综合作用方面最优。 该课题从药群配伍的层面对影响方剂效应的不同配伍进行了方法学上的探索，研究证实小柴胡汤具有降血脂，降肝脂和肝脏指数作用，发现小柴胡汤中三组药群的降脂作用特点及其配伍后的协同增效关系。结果不仅为认识小柴胡汤药群配伍与其降脂作用的关系提供了实验依据，也为小柴胡汤临床应用于高脂血症和小柴胡汤进一步的研发提供了一定的药理依据。