换一批摘要目的： 构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白32(culture filtrate protein 32，CFP32)的重组质粒，在大肠杆菌中表达并纯化重组CFP32，探讨其在结核病血清学诊断中的应用价值。 方法： PCR扩增 cfp32基因片段，将其克隆到pET-21a表达载体。优化表达条件，Ni-NTA亲和层析方法纯化重组CFP32蛋白。建立检测CFP32抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，并用于检测160例临床血清标本中的CFP32抗体。 结果： 克隆了cfp32基因，构建了表达质粒pET21a-CFP32，IPTG诱导在大肠杆菌中得到高表达CFP32蛋白包涵体，SDS-PAGE电泳在30 KD处得到条带，纯化得到高纯度CFP32蛋白，PBS复性后测得蛋白含量为3.46 mg/mL。建立并优化了CFP32检测结核抗体的ELISA方法。97例临床确诊的肺结核患者中62例CFP32抗体阳性，敏感性为63.9％；25例非结核病患者和38例健康人血清CFP32抗体阳性2例，特异性为96.8％。 结论： 成功在大肠杆菌中获得高效表达CFP32蛋白，血清抗体检测表明重组的CFP32蛋白有希望成为结核病血清学诊断的有效候选蛋白之一。
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