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PI3K/Akt特异性siRNA对PI3K/Akt基因表达和白血病细胞耐药性的影响

摘要目的:研究PI3K/Akt小干扰RNA对PI3K/Akt基因表达和白血病细胞耐药性的影响。方法:选择HL-60/VCR细胞作为研究对象,针对Aktl基因靶点的mRNA合成含有19个碱基的siRNA以及阴性对照siRNA,利用脂质体介导转染HL-60/VCR细胞;利用流式细胞仪检测转染前后细胞膜上Akt1第473位丝氨酸磷酸化(p-Akt1)、P170糖蛋白、CD123+和CD34+CD38-表达。体外药敏试验采用MTT法检测转染前后长春新碱(VCR)对白血病细胞的抑制率。 结果:实验组P-Akt1、P170蛋白、CD123+、CD34+CD38-表达水平均较对照组有明显下降(p<0.05);体外药敏实验显示转染后HL-60/NCR细胞对VCR的敏感性有显著提高(p<0.05)。 结论:针对PI3K/Akt信号转导通路的RNA小干扰特异性地抑制了HL-60/VCR细胞Akt1蛋白磷酸化,降低了CD34+抗原的表达,对白血病干细胞(Leukemia Stem Cells,LSC)有一定抑制作用,下调了P170蛋白的表达,提高了白血病细胞对化疗药物的敏感性。为白血病耐药的基因治疗奠定基础。

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