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摘要研究背景: 炎症性肠病(InflammatoryBowelDisease，IBD)是病因尚未确定的慢性非特异性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis，UC)和克罗恩病(Crohn'sDisease，CD)。IBD在我国发病率比较低，但近年来有大幅增加的趋势。由于该疾病自然病程的复杂特殊及对患者生活质量的严重影响，IBD的治疗现已成为消化系统疾病中的难点，日益受到关注。由于目前国内外尚未找到特异性治疗药物，寻找其他疗效显著且副作用小的药物以替代目前的常规药物已成为全世界研究的热点。其中纯天然提取无毒无害的植物药在此方面有独特的优势。表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是绿茶中茶多酚的主要成分，为全天然提取，无毒无害，具抗氧化、抗炎及抗肿瘤等多种生物学活性。2006年10月31日，EGCG被美国FDA批准为第一个植物处方新药，主要用于人类乳头瘤病毒(HPV)引起的生殖器疣，更是把它在临床上的应用提升到一个新的境界，引发人们对它在其它疾病的应用进行了多方面的探索。 目的和意义: 我们在建立三硝基苯磺酸(2，4，6—trinitrobenzenesulfollicacid，TNBS)这种经典大鼠IBD模型的基础上，国内首次采用灌肠给药方式来观察EGCG对这种大鼠实验性结肠炎的作用效果，进而从不同角度对其有关机制进行探讨，以期为EGCG成为IBD有效治疗药物的开发应用提供实验依据。 材料和方法: 1.实验动物的分组：将50只SD大鼠随机分正常对照组、模型组、阳性药物对照组、EGCG组及EGCG预处理组，每组10只。大鼠禁食不禁水24h后，将溶于500ml/L乙醇的TNBS按100mg/kg，体积0.25ml/只，用导管(直径4mm)经肛门插入结肠内约8cm灌肠，建立IBD模型。阳性药物对照组、EGCG组制模24h后，分别用5—ASA(100mg/kg)、EGCG(100mg/kg)灌肠2周，1次/d；EGCG预处理组在制模前3d给予100mg/kgEGCG灌肠干预，1次/d，大鼠TNBS诱导制模后，给予100mg/kgEGCG灌肠2周，1次/d。正常对照组与模型组均给予等量生理盐水灌肠治疗。 2.肉眼观察大鼠结肠大体结构的改变，并评价结肠粘膜损伤指数(CMDI)。取肠组织制作石蜡切片行HE染色及评分。 3.按试剂盒方法检测肠组织中MPO、MDA和NO的含量；Hoechst33258荧光染色法检测大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡的情况。 4.分别用免疫组化、RT—PCR检测肠粘膜iNOS的蛋白和mRNA表达。 5.ELISA检测肠组织中PGE2含量，分别用免疫组化、RT—PCR检测肠粘膜COX-2的蛋白和mRNA表达。 6.分别用ELISA、RT—PCR检测大鼠血清、肠组织IL-1、IL-10的水平。 7.WesternBlotting检测大鼠肠粘膜NF—κBp65蛋白水平的变化。 8.计量资料用均数±标准差表示。两样本均数的比较采用Student'st—test，多样本均数的比较采用OneWayANOVA。P<0.05为有显著性差异。采用SPSS13.0软件进行统计分析。 结论: 1.EGCG灌肠能不同程度改善实验性结肠炎大鼠肠粘膜大体结构及病理组织学征象，其中以EGCG预防灌肠的效果最好。 2.EGCG起保护作用的机制包括：1)抗氧化、抗凋亡作用；2)抑制iNOS的活性，从而减少毒性物质NO的生成；3)降低COX-2的表达，减少组织中花生四烯酸代谢产物PGE2产生。4)局部下调肠组织中IL-1表达，而上调肠组织中IL-10的表达。 3.EGCG可通过降低NF—κBp65蛋白的表达，下调COX-2、iNOS的表达，使其产物PGs、NO生成减少，从而达到减轻炎症的目的。因此NF—κB可作为EGCG治疗大鼠实验性结肠炎的一个有效的分子“靶点”。 4.我们的实验初步证实，EGCG是一种有效的预防和治疗IBD的植物药，它在经济性和安全性上的优势，使之更具有广阔的开发和使用前景。