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摘要背景与目的：肿瘤血管生成为肿瘤恶性生长和转移提供营养和途径，因此抑制肿瘤血管生成是肿瘤生物防治新策略，引起了极大的兴趣和关注，目前数十种针对肿瘤血管形成的分子机制所设计的抗血管生成剂已进入临床试验。人微血管内皮细胞(HMEC)在血管发生中具有重要作用，内皮细胞由骨髓源原祖细胞分化而来，其分化的过程复杂，受到多种因素调控，目前还不能清楚的解释具体的调控过程。通过抑制内皮细胞增殖可以抵抗肿瘤血管生成，进而抑制肿瘤的恶性生长和转移。本研究拟采用内皮细胞模型从中药库中筛选具有抗血管生成的中药，对其水煎剂进行体内体外药效学鉴定，同时分离纯化具有抑制内皮细胞增殖的有效单一组分，然后对该组分进行体外药效学评价。研究方法：将中药材水煎剂经大孔树脂吸附进行总皂苷的分离纯化，分别收集不同浓度乙醇溶液洗脱液，用SFJ3(磺酰罗丹明B)法进行细胞活性检测，选择有效部分用AKTAresource柱分离，按紫外吸收峰收集洗脱液并进行活性验证，蒸发光散射检测组分复杂程度，选择活性高、丰度大、成份简单的峰进行C18柱分离。通过改变流动相和色谱柱进行分离条件优化，同时按等体积分段收集有效部位，进行细胞活性检测和HPLC分析。SRB细胞增殖抑制法测定IC50值；通过控制药物作用时间确定时间与药效关系；划线灼伤法研究细胞迁移；体外基质胶细胞黏附实验分析提取物对细胞黏附能力的影响；HE染色观察药物对细胞染色体的影响。结果：王不留行水煎剂经大孔树脂分离和细胞活性检测发现50％～70％乙醇浓度洗脱液具有细胞活性，经AKTA resource柱分离得(0～6)七种组份群，细胞活性测得(3～6)号组分有活性，选择4号组分经C18柱分离得五组分(A～E)，组分B为有紫外吸收的主峰，但无细胞活性，其活性分布于组分D和组分E中。组分D经蒸发光散射检测为单峰，而组分E包含有4中化合物，鉴于组分E具有很高的细胞活性和丰度，因此对其进一步分析，通过添加甲酸改变流动相pH值可以明显改善分离效果，用乙腈代替甲醇也能使组分E按基线分离。通过SRB法测定组分E的IC50值为3.60μg/ml，时间与药效关系表明加药后4h药效起作用。迁移实验表明加药48h后加药组的细胞迁移受到明显抑制，其迁移率为40.33％，对照组迁移率为77.68％(P<0.05)。细胞黏附实验表明加药组细胞黏附受到明显抑制，且呈浓度依赖关系。 结论：经上述方法筛选出王不留行具有抗血管生成活性，其水煎剂具有明显的新生血管抑制作用。通过对其水煎剂进行分离纯化获得了单一组分群，该组分呈白色晶体，极易溶液水。体外细胞水平评价该组分群具有极强的细胞增殖抑制活性，同时对细胞迁移和黏附能力也具有抑制作用，因此该组分群具有潜在的价值用于抗肿瘤血管生成药物开发。