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摘要根据生物信息学分析结果，对启动子序列进行系列缺失、构建四个缺失植物表达载体，通过农杆菌介导将以上四个表达载体转化遗传模式植物拟南芥，并对转基因拟南芥进行了连续三代筛选，获得了纯合子。并与已知的种子特异表达legA基因启动予和组成型CaMV35S启动子比较，用GUS组织化学染色分析法和荧光定量测定法鉴定MBL基因启动子的启动活性强度、组织特异性和时空表达特性，并对其顺式作用元件进行分析。同时将MBL基因的基本启动子驱动GUS基因在有胚乳的豌豆和水稻种子中进行了瞬时表达。试验结论如下: 1)通过PCR对MBL基因启动子序列进行了系列缺失，获得4个缺失片段MBL-Pe、MBL-Pf、MBL-Pg、MBL-Ph，构建了各缺失片段驱动GUS基因的嵌合植物表达载体：pVKH-MBL-Pe、pVKH-MBL-Pf、pVKH-MBL-Pg、pVKH-MBL-Ph。 2)将4个植物表达载体以电激法导入根癌农杆菌GV3101，通过真空抽滤法将它们转入到了遗传模式植物拟南芥。经过潮霉素抗性筛选和分离比筛选获得了一批转基因纯合子(T3)拟南芥。 3)缺失片段MBI-Pd、MBL-Pf、MBL-Pg、MBL-Ph驱动的GUS基因在转基因拟南芥的根、茎、叶和果荚中不表达，在花和种子中特异表达；MBL-Pe不能启动GUS基因在转基因拟南芥中特异表达。 4)全长启动子MBL-Pd的启动活性强于缺失片段MBL-Pf、MBL-Pg、MBL-Ph都可以启动GUS基因在转基因拟南芥种子中特异表达，MBL-Pf、MBL-Pg、MBL-Ph的启动活性基本相当。瞬时表达结果表明MBL-Pd能够启动GUS基因在种子的胚中表达，而不在胚乳中表达。因此MBL-Pd启动子在有胚乳和无胚乳种子中均表现为胚特异性表达。 5)全长启动子MBL-Pd的时空表达特性表现为：转基因拟南芥开花后约12天开始在种子中启动GUS基因表达，到16天左右表达达到高峰，可见MBL-Pd受种子发育阶段调控、在种子成熟的中后期驱动GUS基因表达，与拟南芥自身种子贮藏蛋白的积累同步。 6)-232～+1区域的ACGT-box、RY-repeat、G-box等是决定MBL基因启动子在种子中特异表达的顺式作用元件。GUS活性荧光定量测定结果表明，缺失这些元件后.启动子的启动活性也相应减弱。