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摘要吗啡长期慢性作用可引起细胞增殖活性、信号分子及受体的变化。本课题选用人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH细胞，研究人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用的细胞增殖活性、Ca2+-CaMKⅡ-pCREB信号转导通路及毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1、M3mRNA表达的影响，以阐明人参皂苷Rgl影响吗啡成瘾的分子机制。 MTT实验结果显示：吗啡慢性作用可抑制SK-N-SH细胞增殖(P<0.01)，1～32μM的Rgl可以显著提高吗啡慢性作用SK-N-SH细胞的增殖活性，其中2μM的Rgl作用最强(P<0.01)；采用荧光分光光度法检测细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i，发现1μM，2μM，4μM的Rgl均可抑制吗啡引起SK-N-SH细胞[Ca2+]i升高(P<0.01)；RT-PCR和Westernblot实验结果表明，吗啡慢性作用引起SK-N-SH细胞CaMKⅡ-βmRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01)，加入纳洛酮作用30min后，可使细胞基因和蛋白表达进一步升高(P<0.05)，不同浓度的Rgl均可翻转此效应(P<0.01)；免疫组织化学实验证实，2μMRgl可明显抑制吗啡和纳洛酮诱导的SK-N-SH细胞CREB磷酸化(pCREB)水平的增高(P<0.01)；应用RT-PCR及荧光定量PCR技术检测SK-N-SH细胞M1、M3mRNA的表达，研究表明，吗啡慢性作用可使SK-N-SH细胞M1、M3mRNA表达显著升高(P<0.01)，加入纳洛酮催促戒断后，M1、M3mRNA表达有增高趋势(P>0.05)。不同终浓度的Rgl(1μM、2μM、4μM)均可显著降低吗啡成瘾和戒断细胞M1、M3mRNA表达(P<0.01)。 本研究结果表明：人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用于SK-N-SH细胞的影响可能通过促进细胞的增殖活性、调节Ca2+-CaMKⅡ-p-CREB信号通路各信号分子的改变、调节细胞膜M1、M3受体的mRNA表达所致。提示：人参皂苷Rgl可作为一种有效的戒毒药物成份缓解吗啡成瘾。