摘要铝诱导有机酸分泌是植物解铝毒的一种重要机制。与有机酸分泌有关的基因,如:苹果酸转运子基因(ALMT1)、柠檬酸转运子基因(ALCT1)、质膜H+—ATPase基因(PHA1)、柠檬酸合酶基因(CS)、苹果酸脱氢酶基因(MDH)等已相继在不同作物上被鉴定出来,它们对有机酸的分泌起着重要的调节作用。然而,A1胁迫条件下,这些基因在同一作物中的表达情况并不清楚。本文以中豆32为材料,同时研究了苹果酸转运子基因、柠檬酸转运子基因以及质膜H+—ATPase基因对铝胁迫的响应。结果如下: 1)铝明显抑制大豆主根的伸长,随着铝处理浓度的增加和铝处理时间的延长,其抑制效果更加明显。其主要抑制部位是距根尖0-5mm的区域。 2)外源加入有机酸明显缓解A1对根系的抑制作用,柠檬酸的缓解效果大于苹果酸。 3)铝处理明显增加了大豆柠檬酸和苹果酸的分泌,随着A1处理浓度的升高,有机酸的分泌逐渐增加。在50μmol/L AlCl3的铝处理4h时,大豆苹果酸的分泌是大豆柠檬酸分泌的248.3%。苹果酸的分泌在A1处理4h时达到最大值,而柠檬酸的分泌在8h时达到最大值。 4)当AlCl3浓度为0-50μmol/L时,随着铝处理浓度的升高,三个基因(苹果酸转运子基因(GmALMT1)、柠檬酸转运子基因(GmALCT1)、质膜H+—ATPase基因(GmPHA1))在根尖表达量增加,当A1处理2—4 h时达到最大。不同根段基因表达分析表明,三个基因在距根尖0-5cm区域铝诱导表达量最高。苹果酸转运子基因在大豆叶片中没有表达,而柠檬酸转运子基因与质膜H+—ATPase基因在叶片中均有表达,但不受铝处理的影响。 5)铝明显增加了大豆根系三个基因的表达。当铝与柠檬酸以(分子比Al:Cit1:1)进行处理时,GmALMT1基因表达量明显低于单独的A1处理,而GmPHA1与GmALCT1的表达与单独A1处理没有明显差异,表明这三个基因在有机酸与A1相互作用过程中呈现不同的表达特点。 上述研究结果为进一步深入探讨有机酸分泌的调节机制奠定了工作基础。
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