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摘要目的： 本研究运用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学以及激光扫描共聚焦显微技术，检测假孕、妊娠早期小鼠子宫内膜中β-TrCP及其所降解的靶蛋白β-catenin、IκBα基因与蛋白的表达、分布规律、动态变化以及对胚胎着床的影响，有助于从分子水平探讨β-TrCP在胚胎着床过程中的分子调控机制，从而为了解人类正常生殖过程机制和生殖方面疾病的诊断、治疗奠定基础。 方法： 1.建立早孕及假孕NIH小鼠动物模型，随机将孕鼠分为7组作为实验组，每组6只小鼠（其中D5需12只）。假孕小鼠作为对照组，收集妊娠D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7以及假孕小鼠子宫及内膜组织，-80℃冻存备用。 2.采用台盼兰尾静脉注射法分离子宫内膜胚胎着床点及其旁组织。 3.运用RT-PCR法检测p-TrCP mRNA、β-catenin mRNA、IκBαmRNA在妊娠早期小鼠子宫内膜中的表达情况及动态变化规律。 4.运用免疫组织化学技术以及Western blotting法检测β-TrCP、β-catenin以及IκBα蛋白在妊娠早期小鼠子宫内膜中的表达情况及动态变化规律。 5.运用激光扫描共聚焦显微技术检测胚胎着床点及其旁组织β-TrCP以及IκBα蛋白的表达情况。 结果： 1.经尾静脉注射台盼兰后，取出双侧子宫，可见条状子宫呈现蓝染带。着床点被蓝染，与非着床点区别明显。 2.RT-PCR分析表明：各组小鼠子宫内膜均有β-TrCP、β-catenin、IκBα mRNA的表达，并且存在时空表达差异。在妊娠D4时，β-TrCP表达水平达到最高峰，而β-catenin、IκBα表达水平降至最低。着床位点β-TrCP mRNA水平比旁组织显著增强（p<0.05），而旁组织中IκBα mRNA水平比着床位点显著增强（p<0.05）。 3.免疫组织化学结果显示：β-TrCP、β-catenin、IκBα蛋白在妊娠早期以及假孕小鼠子宫中均有表达。从妊娠D1开始，β-TrCP蛋白水平逐渐升高，至着床窗口期（D4）达最高水平（p<0.01），并维持到妊娠D5（p<0.05），以后其表达逐渐降低至正常水平。β-catenin、IκBα蛋白在着床前期一直维持在较高水平，与假孕对照组比较有显著差异（p<0.05），但在着床窗口期（D4）明显降低（p<0.05），之后又逐渐升高。β-TrCP蛋白主要集中在胞浆表达，妊娠D1至妊娠D3主要分布于腺上皮、腔上皮，妊娠D4以后集中在基质表达。β-catenin、IκBα蛋白在胞浆、胞核中均有表达，但主要集中在基质表达，腺上皮、腔上皮表达较弱。 4.激光扫描共聚焦显微技术分析显示：β-TrCP、IκBα蛋白在假孕对照、胚胎着床位点及其旁组织中均有表达。着床位点、旁组织中β-TrCP、IκBα蛋白水平与假孕对照组比较有显著差异（p<0.01），着床位点β-TrCP的蛋白水平与旁组织相比，显著性增高（p<0.05）；相反，旁组织中IκBα蛋白水平与着床位点相比，显著性增高（p<0.05）。β-TrCP蛋白绿色荧光阳性信号主要分布在腺上皮、腔上皮的胞浆中，基质中亦有表达。IκBα蛋白红色荧光阳性信号在腺上皮、腔上皮、基质的胞浆和胞核中均有表达。 5.Western blotting显示：各样本均于92kDa、60kDa、50kDa、40kDa处分别出现β-catenin、β-TrCP、内参Tubulin以及IκBα蛋白条带。 结论： 1.β-TrCP、β-catenin、IκBα基因及其蛋白在假孕以及妊娠早期小鼠子宫内膜中均有表达，并存在时空表达差异。 2.β-TrCP作为SCF（Skp1-Cull-F-box）复合物成员之一，参与磷酸化β-catenin、IκBα的泛素化降解。β-TrCP的高水平表达势必造成胞浆中β-catenin、IκBα的较低水平；β-TrCP为Wnt/β-catenin信号通路的负性调节因子和NFκB通路的正性调节因子，β-TrCP在妊娠D4、D5维持较高水平这一事实与胚胎着床窗口期Wnt/β-catenin信号通路处于抑制状态，而NFκB信号通路短暂激活相符。 3.着床点组织中β-TrCP蛋白水平明显高于着床旁组织，着床位点子宫内膜的变化有别于旁组织的变化，着床位点内膜更利于胚胎的侵入。提示β-TrCP可能参与了胚胎着床的侵袭过程。